Определение станозолола в волосах методом масс-спектрометрии с химической ионизацией отрицательными ионами

Станозолол — анаболический андрогенный стероид, которым периодически злоупотребляют спортсмены. Разработан чувствительный, специфичный и воспроизводимый метод количественного определения станозолола в волосах. После добавления станозолола-d3 в качестве внутреннего стандарта образцы волос массой 10–25 мг гидролизовали в 2 мл 1 н раствора NaOH при 65 °C не менее 2 ч. Затем растворы после гидролиза экстрагировали методом твердофазной экстракции. Элюаты выпаривали, добавляли смесь N-метил-N-триметилсилилгептафторбутираамида (MSHFBA) и триметилсилилимидазола (TSIM) в соотношении 1000:20 (об./об.) и нагревали при 80 °C в течение 5 мин. После охлаждения до комнатной температуры добавляли N-метил-бисгептафторбутирамид (MBHFBA), затем смесь нагревали при 80 °C в течение 30 мин. Дериватизированные экстракты анализировали на масс-спектрометре Finnigan MAT 4500 в режиме химической ионизации отрицательными ионами. Хроматографическое разделение проводили с использованием гелия в качестве газа-носителя и капиллярной колонки HP-1 (длина 15 м, внутренний диаметр 0,2 мм, толщина плёнки 0,33 мкм). Метод позволял надёжно количественно определять станозолол в концентрации 50 пг/мг; линейный диапазон составлял до 2500 пг/мг. Прецизионность внутри серии составила 13,2% при концентрации 50 пг/мг и 6,6% при 2500 пг/мг. Прецизионность между сериями составила 13,7% при 50 пг/мг и 6,1% при 2500 пг/мг. Метод применили для анализа станозолола, включённого в шерсть крыс. Самцам крыс линии Long-Evans вводили станозолол внутрибрюшинно в дозе 20 мг/кг 1 раз в сутки в течение 3 дней. Средняя концентрация станозолола в шерсти, собранной на 14-е сутки, составляла 362,4 ± 332,4 пг/мг в пигментированной шерсти и 90,0 ± 46,9 пг/мг в непигментированной. Эти данные свидетельствуют о преимущественном включении станозолола в пигментированную шерсть.