Чувствительный и быстрый микропланшетный метод определения минимальной ингибирующей концентрации растительных экстрактов для бактерий

Для оценки противомикробной активности растительных экстрактов широко применяют методы диффузии в агар, однако они имеют ряд недостатков. Разработан метод микроразведений с использованием 96-луночных микропланшетов и солей тетразолия для индикации роста бактерий. p-Йодонитротетразолиевый фиолетовый [0,2 мг/мл] дал лучшие результаты по сравнению с красным тетразолием и тиазолиловым синим. Метод оказался быстрым и эффективным при работе со Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa и Escherichia coli, а также с неводными экстрактами многих растений. Результаты были воспроизводимыми; для определения минимальной ингибирующей концентрации требовалось всего 10–25 мкл экстракта. Метод позволял различать микробицидный и микробиостатический эффекты и обеспечивал постоянную фиксацию результатов. При использовании S. aureus и экстракта Combretum molle метод был в 32 раза чувствительнее методов диффузии в агар и не зависел от возраста культуры тест-организма в течение 24 часов. Культуру S. aureus можно было хранить в холодном помещении до 10 дней, практически не влияя на результаты анализа. Метод оказался полезным для скрининга растений на противомикробную активность и биотестирования при направленном выделении противомикробных соединений из растений. Значения МИК для сульфизоксазола, норфлоксацина, гентамицина и нитрофурантоина были сходными с приведёнными в литературе, тогда как значения, полученные для триметоприма и ампициллина, у некоторых бактерий были выше.