Влияние созревания ооцитов, оплодотворения и раннего развития эмбрионов крупного рогатого скота in vitro и in vivo на выход и качество бластоцист

Цель исследования — оценить влияние созревания ооцитов, оплодотворения и культивирования у крупного рогатого скота in vivo или in vitro на долю ооцитов, достигающих стадии бластоцисты, а также на качество бластоцист, определяемое по выживаемости после витрификации. В эксперименте 1 использовали четыре группы ооцитов: 1) незрелые ооциты из фолликулов диаметром 2–6 мм; 2) незрелые ооциты из фолликулов диаметром более 6 мм; 3) незрелые ооциты, полученные in vivo непосредственно перед пиком ЛГ; 4) ооциты, созревшие in vivo. Значимо больше бластоцист развивалось из ооцитов, созревших in vivo, чем из ооцитов, полученных непосредственно перед пиком ЛГ, или из ооцитов фолликулов диаметром 2–6 мм. Результаты для ооцитов из фолликулов диаметром более 6 мм были промежуточными. Выживаемость всех бластоцист после витрификации была низкой. В эксперименте 2 ооциты, созревшие in vivo, либо 1) оплодотворяли in vitro, либо 2) оплодотворяли in vivo методом искусственного осеменения, после чего полученные предположительные зиготы извлекали на 1-е сутки. Затем обе группы культивировали in vitro. Выход бластоцист был значимо выше среди ооцитов, оплодотворённых in vivo, чем среди ооцитов, оплодотворённых in vitro. Качество бластоцист в группах не различалось. В обеих группах выживаемость после витрификации была низкой. В эксперименте 3a предположительные зиготы, полученные после созревания ооцитов и оплодотворения in vitro, культивировали либо in vitro в синтетической яйцеводной жидкости, либо in vivo в яйцеводе овцы. В эксперименте 3b зиготы, полученные из ооцитов, созревших и оплодотворённых in vivo, либо извлекали хирургически на 1-е сутки и культивировали in vitro в синтетической яйцеводной жидкости, либо извлекали без хирургического вмешательства на 7-е сутки. Среди групп зигот, происходивших из одного источника оплодотворения — in vivo или in vitro, — выход бластоцист не различался независимо от того, проводилось ли культивирование in vivo или in vitro. Однако качество бластоцист существенно зависело от условий культивирования: бластоцисты, полученные после культивирования in vivo, выживали после витрификации значимо чаще, чем бластоцисты после культивирования in vitro. В совокупности эти результаты показывают, что внутреннее качество ооцита является главным фактором, определяющим выход бластоцист, тогда как условия культивирования эмбрионов играют ключевую роль в формировании их качества.