Влияние ферментных препаратов Helix pomatia на окислительное превращение некоторых метаболитов клостебола ацетата в моче

Клостебола ацетат (4-хлоротестостерона ацетат) — анаболический стероид, применяемый для откорма крупного рогатого скота. Для защиты здоровья населения Европейская комиссия запретила его применение в 1986 году. Поэтому выявление его метаболитов в моче — важный инструмент контроля возможных нарушений. Поскольку метаболиты присутствуют в виде конъюгатов с глюкуроновой кислотой или сульфатом, перед анализом необходимо провести деконъюгацию. В работе описана вариабельность результатов при использовании различных коммерческих препаратов Helix pomatia (SHP) для ферментативного гидролиза конъюгатов. Одновременно наблюдали побочную реакцию окисления: метаболиты со структурой 3-OH-4-ен превращались в соединения со структурой 3-оксо-4-ен. Этого не происходило при инкубации образцов без фермента или с термически инактивированным SHP. Анализ методом ГХ-МС показал, что некоторые метаболиты клостебола ацетата — 4-хлороандрост-4-ен-3α-ол-17-он и 4-хлороандрост-4-ен-3α,17β-диол — окислялись с образованием других метаболитов: 4-хлороандрост-4-ен-3,17-диона и клостебола (4-хлоротестостерона) соответственно. Это превращение подтвердили сравнительным иммуноферментным анализом после ферментативного гидролиза, учитывая различия в перекрёстной реактивности антител к этим метаболитам. Окислительное превращение может иметь большое значение при выборе целевых аналитов для скрининга мочи крупного рогатого скота.