Влияние тимохинона на активность антиоксидантных ферментов, перекисное окисление липидов и ДТ-диафоразу в различных тканях мышей: возможный механизм действия

На первом этапе исследования оценивали влияние перорального введения тимохинона (TQ) на активность антиоксидантных ферментов, перекисное окисление липидов и активность ДТ-диафоразы в тканях печени, сердца и почек интактных мышей. В каждой ткани определяли активность супероксиддисмутазы (СОД; EC 1.15.1.1), каталазы (EC 1.11.1.6), глутатионпероксидазы (GSH-Px; EC 1.11.1.9), глутатион-S-трансферазы (GST; EC 2.5.1.18) и ДТ-диафоразы (EC 1.6.99.2). Пероральное введение мышам TQ в дозах 25, 50 и 100 мг/кг/сут в течение 5 дней подряд значительно снижало активность СОД, каталазы и GSH-Px в печени. Кроме того, более высокие дозы TQ (50 и 100 мг/кг) значительно подавляли активность СОД в сердце. TQ в дозе 100 мг/кг также значительно снижал перекисное окисление липидов в печени и сердце по сравнению с соответствующими контрольными группами. В то же время TQ в дозах 50 и 100 мг/кг повышал активность ДТ-диафоразы в сердце, а в дозе 100 мг/кг — в почках. Изученные дозы TQ не влияли на активность GST и содержание восстановленного глутатиона ни в одной из исследованных тканей. На втором этапе TQ исследовали в качестве субстрата ДТ-диафоразы печени, сердца и почек интактных мышей в присутствии NADPH. Кинетические параметры восстановления TQ до дигидротимохинона (DHTQ) показали, что ДТ-диафораза во всех исследованных тканях эффективно катализирует эту реакцию. Значения Km и Vmax были выше для ДТ-диафоразы печени и ниже для ДТ-диафоразы почек. На третьем этапе TQ и DHTQ исследовали как специфические поглотители супероксид-аниона (образуемого биохимическим путём) и как поглотители свободных радикалов (образуемых фотохимическим путём). Оба вещества поглощали как супероксид-анион, так и свободные радикалы. Значения IC50 для TQ и DHTQ в биохимических и фотохимических тестах находились соответственно в наномолярном и микромолярном диапазонах. Полученные данные могут отчасти объяснять ранее описанное защитное действие TQ in vivo сочетанием антиоксидантных свойств самого вещества и его метаболита DHTQ.