Очистка гликопротеинового аллергена Ag7 из пыльцы полыни методом аффинной хроматографии на конканавалине A

Для оценки способности очищать гликопротеиновый аллерген Ag7 из частично очищенного экстракта пыльцы полыни исследовали две аффинные колонки с иммобилизованным конканавалином A (Con A): Con A-Sepharose и Con A-XP3507. Основное различие между колонками заключалось в характере неспецифических взаимодействий: для Con A-XP3507 преобладали гидрофобные взаимодействия, а для Con A-Sepharose — ионные. Обе колонки эффективно очищали Ag7; выход после специфической элюции вытесняющими сахарами составлял 50%. Добавление в элюирующую среду 1,0 М NaCl и 20% этиленгликоля помогало десорбировать неспецифически связанные вещества перед специфической элюцией адсорбированного Ag7 в присутствии вытесняющих сахаров — альфа-метилглюкозида и альфа-метилманнозида. Наиболее эффективно Ag7 очищался на Con A-Sepharose при комнатной температуре, а не при 4 °C. При аффинной хроматографии на Con A-XP3507 получали несколько более загрязнённый препарат (чистота 54%), чем на Con A-Sepharose (чистота 64%).