Аффинная хроматография на иммобилизованных ионах металлов

Внедрение аффинной хроматографии на иммобилизованных ионах металлов, направленной на специфические боковые цепи белков, открыло новые возможности их очистки. В этом обзоре рассматриваются принципы и практические аспекты IMAC, которую можно проводить в очень мягких, неденатурирующих условиях. IMAC особенно подходит для препаративного группового фракционирования сложных экстрактов и биологических жидкостей, но может применяться и в высокоэффективном режиме — HP-IMAC. Одностадийная очистка с повышением степени чистоты в 1000 раз и более позволяет выделять определённый белок из неочищенных экстрактов в миллиграммовых или граммовых количествах. По эффективности разделения IMAC сопоставима с биоспецифической аффинной хроматографией, при этом комплексы лигандов с иммобилизованными ионами металлов, вероятно, лучше выдерживают эксплуатационные нагрузки, чем антитела или ферменты. Огромный потенциал IMAC и родственных методов металлоаффинной хроматографии пока лишь начинает изучаться и использоваться. Обсуждаются различные способы синтеза адсорбентов для IMAC и проведения самой хроматографии; их применение иллюстрируется на отдельных примерах. Перечислены преимущества и недостатки метода. Предложены эффективные способы устранения отдельных нежелательных эффектов, которые могут возникать при его применении.