Повышение проницаемости кишечных эпителиальных плотных контактов, индуцированное ФНО-α, требует активации NF-κB

У пациентов с болезнью Крона наблюдается патологическое повышение проницаемости кишечного эпителия. Предполагается, что дефект барьерной функции плотных контактов кишечного эпителия является важным этиологическим фактором болезни Крона. ФНО-α повышает проницаемость плотных контактов кишечного эпителия. Поскольку уровни ФНО-α при болезни Крона значительно повышены, обусловленное ФНО-α увеличение проницаемости плотных контактов может вносить вклад в дефект кишечной проницаемости при этом заболевании. Целью исследования было определить некоторые внутриклеточные механизмы, участвующие в модуляции ФНО-α проницаемости плотных контактов кишечного эпителия, с использованием in vitro модели кишечного эпителия, представленной монослоями Caco-2, выращенными на фильтрах. ФНО-α вызывал дозозависимое и времязависимое повышение проницаемости плотных контактов у Caco-2. Индуцированное ФНО-α увеличение проницаемости плотных контактов у Caco-2 коррелировало с активацией NF-κB. Подавление активации NF-κB, индуцированной ФНО-α, с помощью селективных ингибиторов NF-κB — куркумина и триптолида — предотвращало повышение проницаемости плотных контактов у Caco-2, что указывает на необходимость активации NF-κB для этого эффекта ФНО-α. Увеличение проницаемости плотных контактов у Caco-2 сопровождалось снижением экспрессии белка zonula occludens (ZO)-1 и изменением его локализации в межклеточных контактах. Модуляция экспрессии белка ZO-1 и его локализации в межклеточных контактах под действием ФНО-α также предотвращалась ингибиторами NF-κB. ФНО-α не индуцировал апоптоз в клетках Caco-2, что указывает на то, что апоптоз не участвовал в механизме повышения проницаемости плотных контактов у Caco-2 под действием ФНО-α. Эти результаты впервые демонстрируют, что повышение проницаемости плотных контактов у Caco-2, индуцированное ФНО-α, опосредовано активацией NF-κB. Повышение проницаемости сопровождалось зависящим от NF-κB снижением экспрессии белка ZO-1 и нарушением его локализации в межклеточных контактах.