Одностадийная очистка моноклонального антитела к gp130 методом катионообменной жидкостной хроматографии
[One-step purification of monoclonal antibody against gp130 by cation exchange liquid chromatography]
Аннотация
Цель: Разработать метод одностадийной очистки моноклонального антитела B-S12 к gp130 из асцитической жидкости мышей.
Методы: Асцитическую жидкость после фильтрации центрифугированием наносили на катионообменную колонку и очищали элюцией с градиентом ионной силы. Изучали влияние pH буфера для нанесения образца и градиента ионной силы элюирующего буфера на чистоту полученного антитела. Биологическую активность антитела оценивали колориметрическим методом с МТТ.
Результаты: При использовании буфера HEPES 20 ммоль/л (pH 4,0) для нанесения образца и NaCl в концентрации 0–1,0 моль/л для элюции чистота моноклонального антитела B-S12 превышала 90%. Общий выход антитела составил 52%. Очищенное антитело стимулировало пролиферацию клеточной линии XG-2.
Выводы: Разработанный метод одностадийной очистки прост и пригоден для очистки моноклонального антитела B-S12.
Переведем эту статью за 1 час
Загрузите PDF, а мы сделаем полный перевод, краткий конспект и красивую инфографику.
Попробовать бесплатно →Также в Подтеме: еженедельные литобзоры, база международных клинреков и конспекты свежих мед. статей и подкастов каждый день.