Очистка моноклонального антитела к вирусу японского энцефалита методом хроматографии на керамическом гидроксиапатите без использования белков A и G

Очистка антител с использованием белков A и G стала стандартным методом в научных исследованиях и промышленных процессах. Однако традиционный метод включает трехэтапную процедуру, в том числе замену буфера перед хроматографией. Кроме того, для элюирования с белками A и G требуется низкий pH, что вызывает агрегацию антител и снижает их иммунологическую активность. В настоящей работе предложен двухэтапный метод с использованием хроматографии на гидроксиапатите и мембранной фильтрации без белков A и G. Этот новый метод сокращает продолжительность каждого цикла до одной трети по сравнению с традиционным методом. При использовании двухэтапного метода в элюате было получено 90,2% очищенных моноклональных антител, достигнута чистота более 90%, при этом сохранилась большая часть антигенспецифической активности. Полученные данные свидетельствуют, что двухэтапный метод с использованием хроматографии на гидроксиапатите и мембранной фильтрации следует рассматривать как альтернативу очистке с использованием белков A и G.