Исследование метаболизма туринабола у лошадей

Туринабол (4-хлор-17α-метил-17β-гидроксиандроста-1,4-диен-3-он) — синтетический анаболический андрогенный стероид для приема внутрь. Как и другие анаболические стероиды, он относится к запрещенным веществам в конном спорте. Метаболизм туринабола у человека изучен ранее, однако о его метаболизме у лошадей известно мало. В настоящей работе исследовали метаболизм туринабола in vitro и in vivo у скаковых лошадей, чтобы определить наиболее подходящие метаболиты-мишени для выявления его применения. В исследованиях in vitro туринабол инкубировали со свежими микросомами печени лошади. Метаболиты из инкубационной смеси выделяли жидкостно-жидкостной экстракцией и анализировали методом газовой хроматографии–масс-спектрометрии (GC-MS) после триметилсилилирования. Основным путем биотрансформации туринабола оказалось гидроксилирование в положениях C6, C16 и C20 с образованием 6β-гидрокситуринабола (M1), 20-гидрокситуринабола (M2), двух стереоизомеров 6β,16-дигидрокситуринабола (M3a, M3b) и 6β,20-дигидрокситуринабола (M4). Метаболит 6β-гидрокситуринабол был подтвержден с использованием аутентичного стандарта сравнения. Структуры всех остальных метаболитов туринабола были предположительно идентифицированы по результатам интерпретации масс-спектров. В исследованиях in vivo двум лошадям туринабол вводили перорально. Для анализа собирали образцы мочи до введения препарата и после него. Свободные и конъюгированные метаболиты выделяли методом твердофазной экстракции и анализировали методом GC-MS, как описано для исследований in vitro. Туринабол подвергался интенсивному метаболизму, а исходный препарат в моче не обнаруживался. Два метаболита, выявленных в исследованиях in vitro, — 20-гидрокситуринабол и 6β,20-дигидрокситуринабол — также обнаруживались в образцах мочи, собранных после введения препарата. Кроме того, были выявлены 17-эпи-туринабол (M5) и еще шесть метаболитов (M6a–M6c и M7a–M7c), образующихся в результате гидроксилирования D-кольца и восстановления A-кольца. За исключением 17-эпи-туринабола, ни один из этих метаболитов ранее не описывался ни у одного вида животных. Все метаболиты in vivo выявлялись в течение 48 ч после введения препарата.