Агонисты, селективные к рецепторам ретиноидов, регулируют раннее развитие и дифференцировку эмбрионов крупного рогатого скота, а также экспрессию генов, связанных с остановкой клеточного цикла и апоптозом, при культивировании in vitro

Одна из основных задач репродуктивной биотехнологии — выявить сигнальные пути, регулирующие раннее развитие эмбриона и распределение клеток между внутренней клеточной массой (ВКМ) и трофэктодермой (ТЭ). Ретиноиды регулируют развитие и дифференцировку бластоцист крупного рогатого скота in vitro, однако роль рецепторов ретиноидов X (RXR) остаётся неясной. В настоящей работе сравнивали влияние синтетического агониста RXR (LG100268; LG) и агониста рецептора ретиноевой кислоты (RAR) — полностью транс-ретиноевой кислоты (ATRA) — на образование бластоцист. Полученные in vitro морулы обрабатывали в течение 48 ч LG в концентрации 0,1, 1 или 10 мкМ, ATRA в концентрации 0,7 мкМ либо оставляли без добавок. ATRA не повышала частоту развития эмбрионов до стадии бластоцисты, тогда как LG в концентрации 0,1 мкМ повышал как частоту образования бластоцист, так и частоту вылупления. При воздействии LG в концентрации 10 мкМ увеличивалось число клеток ВКМ, тогда как в ТЭ на фоне LG наблюдалось дозозависимое снижение их числа. Экспрессия генов p53 и p66 при воздействии LG не менялась, но повышалась при воздействии ATRA. И LG, и ATRA активировали экспрессию bax — гена, способствующего апоптозу, — и H2A.Z, гена, связанного с клеточным циклом. Эти результаты позволяют предположить, что в эмбрионах крупного рогатого скота ATRA активирует p53-зависимый путь апоптоза, а LG — p53-независимый. Во всех экспериментальных группах экспрессия p53 и H2A.Z сильно коррелировала и положительно (r=0,93; p<0,0001); оба белка связаны с клеточным циклом. Агонисты RXR могут применяться для регуляции развития и дифференцировки бластоцист.