Ретиноевая кислота повышает способность к развитию ооцитов крупного рогатого скота с подавленным мейозом

Введение: Хотя высокие дозы витамина A могут оказывать тератогенное действие на эмбрион, показано, что ретинол поддерживает потенциал ооцитов к развитию in vivo. Аналогичным образом, добавление метаболита ретинола — 9-цис-ретиноевой кислоты — в среду для культивирования ооцитов in vitro может способствовать созреванию цитоплазмы и последующему раннему развитию эмбриона. Цель исследования — оценить влияние ретиноевой кислоты в концентрации 5 нмоль/л при прематурации и созревании in vitro комплексов «ооцит — кумулюс» крупного рогатого скота.

Методы и результаты: Ооциты получали от коров путем аспирации. Их либо удерживали в состоянии мейотического ареста с помощью росковитина в концентрации 25 мкмоль/л с последующим созреванием, либо давали им созревать в благоприятных условиях (контроль). Миграцию кортикальных гранул оценивали после прематурации и созревания: ооциты окрашивали флуоресцентной меткой и исследовали методом лазерной конфокальной и флуоресцентной микроскопии. После оплодотворения in vitro и культивирования в модифицированной синтетической среде, имитирующей жидкость яйцевода, оценивали: (i) развитие эмбрионов in vitro; (ii) способность бластоцист сохранять жизнеспособность после витрификации и оттаивания; (iii) число клеток разных типов с помощью флуоресцентной микроскопии. Присутствие ретиноевой кислоты в концентрации 5 нмоль/л на протяжении всего созревания in vitro оказывало вредное действие. Однако её добавление только на этапе прематурации улучшало миграцию цитоплазматических гранул, развитие эмбрионов, переносимость криоконсервации и общее число клеток, повышая тем самым качество эмбрионов.

Выводы: Прематурация в присутствии ретиноевой кислоты повышает цитоплазматическую компетентность ооцитов крупного рогатого скота, созреваемых in vitro. Пока молекулярные механизмы изучены недостаточно, применять ретиноевую кислоту при созревании ооцитов человека было бы безответственно, особенно с учётом узкого временного окна воздействия и возможных межвидовых различий в чувствительности ооцитов и их защите от эпигенетических эффектов ретинола.