Выявление нового функционального домена ангиопоэтиноподобных белков 3 (ANGPTL3) и 4 (ANGPTL4), участвующего в связывании и ингибировании липопротеинлипазы (ЛПЛ)

Ангиопоэтиноподобные белки 3 (ANGPTL3) и 4 (ANGPTL4) — секретируемые белки, которые частично регулируют обмен триглицеридов (ТГ), ингибируя липопротеинлипазу (ЛПЛ). Недавно мы показали, что введение мышам дикого типа моноклонального антитела 14D12, специфичного к ANGPTL4, воспроизводит фенотип нокаутных по Angptl4 мышей (−/−) со сниженным уровнем ТГ в сыворотке. В настоящем исследовании мы определили, что антитело 14D12 распознаёт участок ANGPTL4 мыши, соответствующий аминокислотам Gln(29)–His(53); этот участок мы обозначили как специфический эпитоп 1 (SE1). Антитело 14D12 препятствовало связыванию ANGPTL4 с ЛПЛ, что согласуется с его способностью нейтрализовать ингибирующее действие ANGPTL4 на ЛПЛ. Сопоставление последовательностей всех представителей семейства ангиопоэтинов показало, что сходная с SE1 ANGPTL4 последовательность есть только у ANGPTL3 и соответствует аминокислотам Glu(32)–His(55). Мы получили моноклональное антитело мыши к этому сходному с SE1 участку ANGPTL3. Это антитело, обозначенное как 5.50.3, ингибировало связывание ANGPTL3 с ЛПЛ и нейтрализовало опосредованное ANGPTL3 ингибирование активности ЛПЛ in vitro. Введение антитела 5.50.3 мышам дикого типа и мышам с гиперлипидемией приводило к снижению уровня ТГ в сыворотке, воспроизводя липидный фенотип мышей с нокаутом Angptl3 (−/−). Полученные результаты показывают, что участок SE1 ANGPTL3 и ANGPTL4 представляет собой домен, важный для связывания с ЛПЛ и ингибирования её активности in vitro и in vivo. Кроме того, результаты свидетельствуют о том, что терапевтические антитела, нейтрализующие ANGPTL4 и ANGPTL3, могут быть полезны для лечения некоторых форм гиперлипидемии.