HY253, новый аналог декагидрофлуорена из Aralia continentalis, вызывает остановку клеточного цикла в фазе G1 и апоптоз, опосредованный цитохромом c, в клетках рака лёгкого человека A549

Цель: В ходе поиска новых регуляторов клеточного цикла и апоптоза — потенциальных противоопухолевых препаратов — из корней Aralia continentalis было выделено новое соединение HY253 с молекулярной структурой 7,8a-дивинил-2,4a,4b,5,6,7,8,8a,9,9a-декагидро-1H-флуорен-2,4a,4b,9a-тетраола. Целью настоящего исследования была оценка механизмов остановки клеточного цикла и индукции апоптоза под действием HY253 в клетках рака лёгкого человека A549.

Методы: Для изучения влияния HY253 на прогрессирование клеточного цикла в клетках A549 методом проточной цитометрии определяли содержание ДНК после обработки клеток HY253 в концентрации 35 мкМ. Кроме того, для оценки индукции апоптоза в клетках A549, обработанных HY253 в концентрации 70 мкМ в течение 24 и 48 ч, использовали метод TUNEL. Влияние HY253 на белки, связанные с апоптозом и регуляцией клеточного цикла, изучали методом вестерн-блоттинга.

Результаты: Проточная цитометрия выявила выраженную остановку клеточного цикла в фазе G1 в клетках A549, обработанных HY253 в концентрации 35 мкМ. Индуцированная HY253 остановка клеточного цикла в фазе G1 сопровождалась снижением экспрессии циклина D и повышением экспрессии p21CIP1 вследствие фосфорилирования p53 по Ser-15, что приводило к увеличению содержания гипофосфорилированного pRb в клетках A549. Кроме того, метод TUNEL и вестерн-блоттинг выявили выраженную индукцию апоптоза в клетках A549, обработанных HY253 в концентрации 70 мкМ в течение 48 ч. Индукция апоптоза в клетках A549 под действием HY253 также была связана с высвобождением цитохрома c из митохондрий, что приводило к активации каспаз 9 и 3 и расщеплению поли(АДФ-рибозо)полимеразы (PARP).

Выводы: Полученные результаты показывают, что HY253 — новое антипролиферативное соединение, выделенное из корней Aralia continentalis, — вызывает остановку клеточного цикла в фазе G1 и апоптоз в клетках A549. На основании этих результатов можно предположить, что HY253 способен стать перспективным кандидатом для химиотерапии рака лёгкого человека за счёт повышения экспрессии и активации гена p53.