Капсулы Хуанцин Цинжэ Чуби модулируют ось lncRNA AP005432.1/PI3K/AKT и связаны с улучшением субъективного восприятия состояния здоровья пациентами и снижением воспаления при анкилозирующем спондилите

Этнофармакологическая значимость: Капсулы Хуанцин Цинжэ Чуби (HQC) — препарат, изготовляемый в медицинском учреждении на основе формулы Цзяньпи Цинжэ Тунло, — продемонстрировали терапевтическую эффективность при анкилозирующем спондилите (АС). Однако лежащие в основе эффекта механизмы, особенно их связь с субъективным восприятием пациентами своего состояния и сигнальной осью lncRNA AP005432.1/PI3K/AKT, остаются неясными.

Цель: Изучить связь между применением HQC и улучшением субъективного восприятия своего состояния пациентами, а также изменением иммуновоспалительных маркеров у больных АС. Кроме того, в экспериментах in vitro оценивали, ослабляет ли HQC воспалительную реакцию посредством модуляции сигнального пути lncRNA AP005432.1/PI3K/AKT.

Методы: Проведён ретроспективный анализ данных 189 госпитализированных пациентов с АС для оценки изменений показателей субъективного восприятия своего состояния (SF-36, VAS, SAS и SDS) и иммуновоспалительных показателей до и после лечения HQC. Для коррекции по возрасту, полу, длительности заболевания, сопутствующей терапии и коморбидным состояниям применяли ковариационный анализ (ANCOVA); при множественных сравнениях использовали поправку Бонферрони. Устойчивость результатов оценивали в анализах чувствительности, в том числе с дополнительной поправкой по росту и массе тела и после исключения пациентов, получавших биологические базисные противовоспалительные препараты. Для молекулярного подтверждения экспрессии lncRNA AP005432.1 и уровней цитокинов из когорты отобрали 20 пациентов с АС, получавших HQC, и 20 здоровых лиц. В экспериментах in vitro использовали модель совместного культивирования мононуклеарных клеток периферической крови пациентов с АС и фибробластоподобных синовиоцитов. С помощью теста CCK-8, ИФА, ОТ-ПЦР в реальном времени и иммуноблоттинга оценивали влияние сыворотки, полученной при лечении HQC, снижения или повышения экспрессии lncRNA AP005432.1 и модуляции пути PI3K/AKT на жизнеспособность клеток, воспалительные цитокины (TNF-α, IL-6, IL-17, IL-10) и белки, связанные с сигнальным путём (p-PI3K и p-AKT).

Результаты: По данным клинического наблюдения, применение HQC было статистически значимо связано с улучшением показателей субъективного восприятия своего состояния пациентами и снижением воспалительных маркеров, включая СОЭ, высокочувствительный СРБ и отношение нейтрофилов к лимфоцитам. Связь сохранялась после полной поправки на смешивающие факторы и в анализах чувствительности; исключением был домен «Ролевое функционирование, обусловленное эмоциональным состоянием» (RE) шкалы SF-36, для которого статистическая значимость не сохранилась после поправки Бонферрони. Молекулярный анализ выявил у пациентов с АС повышенную экспрессию lncRNA AP005432.1 и более высокие уровни провоспалительных цитокинов; после лечения HQC оба показателя снизились. В экспериментах in vitro мононуклеарные клетки периферической крови пациентов с АС стимулировали пролиферацию фибробластоподобных синовиоцитов, повышали экспрессию lncRNA AP005432.1, активировали сигнальный путь PI3K/AKT и усиливали секрецию провоспалительных цитокинов. Сыворотка, полученная при лечении HQC, и снижение экспрессии lncRNA AP005432.1 обращали эти эффекты. Активация пути PI3K/AKT ослабляла ингибирующее действие снижения экспрессии lncRNA AP005432.1, тогда как сочетанное применение HQC и снижение экспрессии этой РНК усиливали подавление воспалительных реакций, вызванных активатором.

Выводы: Применение HQC устойчиво связано с улучшением субъективного восприятия своего состояния пациентами и снижением воспалительной активности при АС после поправки на ряд смешивающих факторов. Результаты экспериментов in vitro позволяют предположить, что противовоспалительное действие HQC может быть обусловлено, по крайней мере частично, снижением экспрессии lncRNA AP005432.1 и подавлением активации сигнального пути PI3K/AKT. Эти данные указывают на возможную терапевтическую мишень при АС и обосновывают дальнейшее изучение HQC.