Лектин томата, специфичный к поли-N-ацетиллактозамину, взаимодействует с париетальными клетками желудка. Выявление мембранного гликопротеина тубуловезикул массой 60–90 кДа, связывающего лектин томата

Цитоплазматические тубуловезикулярные и канальцевые мембраны париетальных клеток желудка непосредственно участвуют в секреции соляной кислоты. Для характеристики гликопротеинов этих мембран мы исследовали связывание с париетальными клетками панели лектинов в парафиновых срезах желудка крысы, собаки и свиньи. Лектин из Lycopersicon esculentum (томата) и Solanum tuberosum (картофеля), специфичный к поли-N-ацетиллактозамину, а также специфичный к галактозе лектин Ricinus communis (RCA120) интенсивно связывались с цитоплазмой париетальных клеток всех трёх видов; характер окрашивания указывал на наличие внутриклеточной мембранной сети. Связывание с париетальными клетками подтвердили методом двойного мечения с использованием аутоантител к париетальным клеткам, полученных от пациентов с аутоиммунным гастритом. С этими лектинами также интенсивно связывались слизистые клетки и муцин. Другие типы клеток желудка не окрашивались лектинами томата и картофеля, но слабо окрашивались RCA120. При электронной микроскопии участков связывания биотинилированного лектина томата или RCA120 со стрептавидином, меченным золотом, выявлено специфическое связывание с люминальной поверхностью тубуловезикулярных и канальцевых мембран париетальных клеток, а также с содержимым секреторных гранул слизистых клеток. При лектин-блоттинге лектин томата и RCA120 связывались с основным компонентом кажущейся молекулярной массой 60–90 кДа в мембранах желудка крысы, собаки и свиньи. Фракция тубуловезикулярных мембран, обогащённая в 10 раз по активности K⁺-зависимой фосфатазы, также была обогащена в 3 раза по связыванию лектина томата, определённому методом твердофазного лектинового анализа. Компонент массой 60–90 кДа из детергентных экстрактов тубуловезикулярных мембран собаки, меченных ¹²⁵I, связывался с аффинным сорбентом с лектином томата на сефарозе и специфически элюировался N,N′,N′-триацетилхитотриозой. После обработки N-гликаназой компонент массой 60–90 кДа превращался в чёткую полосу массой 35 кДа. Мы заключаем, что: (1) гликопротеин мембран массой 60–90 кДа, локализованный на люминальной поверхности тубуловезикул и канальцев париетальных клеток, интенсивно связывается с лектином томата и RCA120; (2) гликопротеин состоит из белка-основы массой 35 кДа, гликозилированного N-гликанами, вероятно содержащими последовательности поли-N-ацетиллактозамина с концевыми остатками галактозы. Свойства этого гликопротеина массой 60–90 кДа идентичны свойствам основного аутоантигена париетальных клеток, распознаваемого сыворотками пациентов с аутоиммунным гастритом. (Аннотация сокращена до 400 слов.)