HY253, новый аналог декагидрофлуорена, индуцирует апоптоз по внутреннему пути и вызывает остановку клеточного цикла в клетках гепатоцеллюлярной карциномы HepG2

Недавно из корней Aralia continentalis — традиционного лекарственного растения, известного как Dokwhal, — был выделен HY253, новый аналог декагидрофлуорена с молекулярной структурой 7,8a-divinyl-2,4a,4b,5,6,7,8,8a,9,9a-decahydro-1H-fluorene-2,4a,4b,9a-tetraol. Ранее мы сообщали о цитотоксическом действии HY253 на клетки рака лёгкого A549 и рака шейки матки HeLa человека. Целью настоящего исследования была оценка молекулярных механизмов остановки клеточного цикла и индукции апоптоза в клетках гепатоцеллюлярной карциномы HepG2 человека. Проточная цитометрия показала, что обработка клеток HepG2 HY253 в концентрации 60 мкмоль/л вызывает выраженную остановку клеточного цикла в фазе G1, связанную с подавлением фосфорилирования Rb и снижением уровня циклина D1. Кроме того, по данным иммуноблоттинга, остановка клеточного цикла в фазе G1 сопровождалась повышением уровня ингибиторов циклин-зависимых киназ p21(CIP1) и p27(KIP1). Анализ TUNEL и иммуноблоттинг выявили индукцию апоптоза в клетках HepG2 после обработки HY253 в концентрации 100 мкмоль/л в течение 24 ч. Апоптоз сопровождался высвобождением цитохрома c из митохондрий, связанным со снижением уровня антиапоптотического белка Bcl-2; это, в свою очередь, приводило к активации каспаз-9 и -3 и протеолитическому расщеплению поли(АДФ-рибозо)-полимеразы (PARP). Таким образом, HY253 может стать перспективным исходным соединением для разработки химиотерапии рака печени человека за счёт повышения экспрессии и активации гена p53.