Внутрисердечное введение лектина томата эмбрионам мыши in utero для оценки почечного кровотока

Образование и перфузия развивающихся почечных сосудов, за исключением сосудов клубочков, изучены недостаточно. Сосудистая сеть формируется посредством ангиогенеза — ветвления существующих крупных сосудов — и васкулогенеза — образования сосудов de novo. Методы картирования перфузии, такие как создание слепков сосудов с помощью смолы, ультразвуковая визуализация in vivo и микродиссекция, не позволяют в полной мере показать тесную взаимосвязь этих процессов с развивающимися структурами почки внутри эмбриона. Описана методика микроинъекций ФИТЦ-меченого лектина томата в сердце эмбрионов мыши in utero под ультразвуковым контролем для оценки становления почечной перфузии. Лектин томата распределялся по всему эмбриону, после чего извлекали почки. Ткани одновременно окрашивали для выявления различных структур почки, включая предшественники нефронов, структуры нефронов, эпителий мочеточникового зачатка и сосуды. Начиная с E13.5 перфузировались крупные сосуды, тогда как периферические сосуды оставались неперфузированными. К E15.5 и E17.5 начинали перфузироваться мелкие периферические сосуды и клубочки. Эта экспериментальная методика необходима для изучения роли сосудистой сети и кровотока в эмбриональном развитии.