Применение меченого томатного лектина для визуализации сосудистых структур

Внутрисосудистое введение флуоресцентно меченного или биотинилированного томатного лектина оценивали как метод выявления сосудистых элементов у лабораторных мышей. Агглютинин Lycopersicon esculentum (томатный лектин) вводили внутрисосудисто в дозе 50–100 мкг на 100 мкл — через хвостовую вену, через канюлю, установленную в яремную вену, или непосредственно в левый желудочек сердца. Ткани исследовали методом флуоресцентной микроскопии на тонких криостатных срезах толщиной 10–12 мкм или толстых срезах толщиной 50–100 мкм, полученных на вибратоме. Ткани, меченные биотинилированным лектином, исследовали методом светлопольной или электронной микроскопии после обработки для выявления биотина. Внутрисосудистое введение томатного лектина приводило к маркировке сосудистых структур в различных тканях, включая головной мозг, почки, печень, кишечник, селезёнку, кожу, скелетные и сердечную мышцы, а также экспериментальные опухоли. Анализ флуоресценции в сыворотке показал, что лектин удалялся из циркулирующей крови в течение 2 мин. Маркировка капилляров была заметна в тканях, полученных в течение 1 мин после внутрисосудистого введения, сохранялась выраженной около 1 ч, а затем значительно ослабевала; через 12 ч её было трудно обнаружить. Изображения, полученные методом световой микроскопии, указывают на связывание лектина с эндотелиальными клетками капилляров и клетками эндотелия, выстилающими некоторые более крупные сосуды. Электронная микроскопия подтвердила маркировку поверхностей эндотелиальных клеток, обращённых в просвет сосудов. Маркировка сосудов томатным лектином совместима с различными другими методами морфологического мечения, включая гистохимию и иммуноцитохимию, поэтому этот чувствительный метод позволяет выявлять сосудистую сеть в связи с развитием, строением и функцией окружающей паренхимы.