Разработка и оценка технологичности химически определённой среды для производства терапевтических белков в клетках CHO

Преимущества самостоятельно разработанных химически определённых (CD) сред для производства терапевтических белков на основе культивирования клеток по сравнению с коммерческими средами включают более эффективный контроль исходного сырья и расширение выбора поставщиков сред, а главное — гибкость, необходимую для разработки и последующей оптимизации процесса производства терапевтических белков. В результате нескольких раундов скрининга с использованием планирования экспериментов, а также исследований по внесению дополнительных компонентов среды и её оптимизации была успешно разработана базальная химически определённая среда (CDM) для культивирования клеток CHO. Жидкая CDM, приготовленная собственными силами, обеспечивала показатели культивирования клеток, сопоставимые с показателями коммерческой контрольной среды. Однако при передаче той же рецептуры CDM двум крупным коммерческим поставщикам сред для производства показатели культивирования клеток в новых партиях среды были значительно ниже, чем при использовании среды, приготовленной в лаборатории. Было начато исследование, чтобы определить, чувствительны ли ключевые компоненты среды к крупномасштабному приготовлению готовой среды поставщиками. В дальнейшем исходную рецептуру CDM пришлось переработать в основную среду, пригодную для крупномасштабного производства. Модифицированная основная среда с двумя отдельными добавками, из которых готовили конечную CDM, позволила восстановить ожидаемые показатели культивирования клеток и продуктивность по моноклональному антителу (mAb). Устойчивость характеристик роста и продукции была подтверждена ещё в двух клеточных линиях, экспрессирующих mAb. Эта работа показывает, что надёжной является не просто среда, демонстрирующая хорошие результаты на этапе разработки: она также должна воспроизводимо производиться коммерческими поставщиками сред.