Новые метаболиты дростанолона в моче человека, выявленные методом тандемной масс-спектрометрии с жидкостной хроматографией и времяпролётным анализатором, и их применение в допинг-контроле

Дростанолон относится к числу наиболее часто выявляемых анаболических андрогенных стероидов при допинг-контроле. В настоящем исследовании изучали профиль метаболитов дростанолона в моче методом жидкостной хроматографии с квадрупольным времяпролётным масс-анализатором (LC-QTOF-MS) в режимах полного сканирования и направленного тандемного масс-спектрометрического анализа с точным измерением массы. Препарат ввели одному здоровому мужчине-добровольцу; образцы мочи исследовали после жидкостно-жидкостной экстракции и прямого ввода. Хроматографические пики потенциальных метаболитов выявляли по теоретическому иону [M−H]− в эксперименте полного сканирования, а фактические депротонированные ионы анализировали в режиме направленного тандемного масс-спектрометрического анализа. У дростанолона подтвердили 11 метаболитов, включая пять новых сульфатных конъюгатов, пять глюкуронидных конъюгатов и один свободный метаболит. Поскольку у метаболитов II фазы отсутствовали информативные фрагментные ионы, позволяющие охарактеризовать структуру стероидного кольца дростанолона, для получения структурных данных о триметилсилилированном метаболите I фазы, высвобожденном после ферментативного гидролиза, использовали газовую хроматографию — масс-спектрометрию (ГХ-МС); на основании совокупных результатов масс-спектрометрии предложили предполагаемую структуру. Были определены сроки выявления метаболитов. S4 (2α-метил-5α-андростан-17-он-6β-ол-3α-сульфат) и G1 (2α-метил-5α-андростан-17-он-3α-глюкуронид) признаны потенциально новыми биомаркерами употребления дростанолона: после внутримышечного введения их можно выявлять до 24 дней методом жидкостно-жидкостной экстракции и до 7 дней методом прямого ввода. S4 и G1 также обнаружили в двух рутинных образцах мочи, положительных на дростанолон.