Выявление O- и N-сульфатных метаболитов станозолола и оценка их роли в качестве дополнительных маркеров допинг-контроля

Станозолол (STAN) относится к числу наиболее часто выявляемых анаболических андрогенных стероидов при допинг-контроле в спорте. Злоупотребление STAN обычно выявляют путем определения метаболитов, экскретируемых в конъюгированной с глюкуроновой кислотой форме после ферментативного гидролиза, либо методом прямого определения с помощью жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (LC-MS/MS). Хорошо известно, что некоторые ранее описанные метаболиты образуются в результате формирования конъюгатов сульфата по C17, которые в моче превращаются в 17-эпимеры. Поэтому сульфатирование представляет собой важный метаболический путь II фазы для STAN, который до настоящего времени не был всесторонне изучен. Целью настоящей работы была оценка сульфатной фракции метаболизма STAN методом LC-MS/MS для выявления потенциальных долгосрочных метаболитов, значимых для допинг-контроля. Шесть здоровых мужчин получили STAN перорально или внутримышечно; образцы мочи собирали в течение 31 дня после введения. Сульфатирование доступных на рынке метаболитов I фазы, использованных в качестве стандартов, проводили для получения данных масс-спектрометрии, необходимых для разработки аналитических стратегий выявления потенциальных сульфатных метаболитов: сканирования по нейтральным потерям, сканирования ионов-предшественников и мониторинга выбранных реакций. Методом LC-MS/MS были выявлены и охарактеризованы 11 сульфатных метаболитов (M-I–M-XI). В статье представлены ценные данные об ионизации и фрагментации O-сульфатов и N-сульфатов. Результаты показали, что при определении STAN сульфатные метаболиты не увеличивают ретроспективность выявления по сравнению с ранее описанным долгосрочным метаболитом — эпистанозолол-N-глюкуронидом. Однако сульфатные метаболиты могут служить дополнительными маркерами злоупотребления STAN. © 2016 John Wiley & Sons, Ltd.