Чувствительное выявление глюкуронида 3′-гидроксистанозолола методом жидкостной хроматографии — тандемной масс-спектрометрии

Станозолол — один из наиболее часто выявляемых анаболических стероидов в образцах допинг-контроля. Это соединение в значительной степени метаболизируется, и его метаболиты можно обнаруживать в моче значительно дольше, чем исходное вещество. Основные метаболиты станозолола выводятся с мочой в виде глюкуронидных конъюгатов; глюкуронид 3′-гидроксистанозолола (3STANG) — один из наиболее значимых метаболитов в моче человека. Поэтому перед экстракцией обычно проводят ферментативный гидролиз. В настоящей работе описан метод чувствительного выявления интактного глюкуронида 3′-гидроксистанозолола методом жидкостной хроматографии — тандемной масс-спектрометрии. Метод основан на простой и быстрой пробоподготовке с использованием однократной твердофазной экстракции, без ферментативного гидролиза и дериватизации. Он позволяет выявлять употребление станозолола в моче человека при концентрации 25 пг/мл. Метод валидирован в соответствии с рекомендациями Eurachem. Матричный эффект, выраженный в усилении ионного сигнала, составил +14%. Эффективность экстракции — 93%. Предел обнаружения, при котором выполняются все критерии WADA для хроматографии и масс-спектрометрии, составил 50 пг/мл. Применение метода в исследовании выведения показало, что глюкуронид 3′-гидроксистанозолола можно подтвердить в течение 10 дней после перорального приёма 2 мг станозолола, что почти на 50% увеличивает продолжительность выявления по сравнению с другими метаболитами и методами.