Выявление и структурное исследование метаболитов станозолола в моче человека методом жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией

Изучена применимость жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией в режиме сканирования по ионам-предшественникам для выявления метаболитов станозолола в моче. Ион-продукт с отношением массы к заряду (m/z) 81 был выбран в качестве специфичного для метаболитов станозолола без модификаций в A- или N-кольце, а ионы-продукты с m/z 97 и 145 — для метаболитов, гидроксилированных в N-кольце, и метаболитов 4-гидроксистанозолола соответственно. В этих условиях в положительной допинг-пробе были обнаружены исходный препарат и до 15 метаболитов. Исследование образца от химерной мыши uPA-SCID, полученного после введения станозолола, выявило наличие ещё 4 метаболитов. На основании информации, полученной из спектров ионов-продуктов, был разработан метод мониторинга выбранных реакций для выявления 19 соединений. Этот метод применили к нескольким положительным допинг-пробам. Все метаболиты были обнаружены и в образце от мыши uPA-SCID, и в положительных образцах мочи человека, но ни в одном из исследованных холостых образцов не выявлялись, что подтверждает метаболическую природу всех обнаруженных соединений. Кроме того, применение метода мониторинга выбранных реакций в однократном исследовании выведения у человека показало, что один из метаболитов — 4ξ,16ξ-дигидроксистанозолол — можно обнаруживать в режиме отрицательной ионизации дольше, чем метаболиты, обычно используемые при допинг-контроле для скрининга употребления станозолола: 3′-гидроксистанозолол, 16β-гидроксистанозолол и 4β-гидроксистанозолол. Применение разработанного подхода к нескольким положительным допинг-пробам подтвердило пригодность этого метаболита для скрининга употребления станозолола. Наконец, для каждого обнаруженного метаболита была предложена предположительная структура на основании спектров ионов-продуктов, измеренных по точным значениям масс методом UPLC-QTOF MS.