Новая аналитическая стратегия на основе газовой хроматографии с высокоразрешающей масс-спектрометрией Orbitrap в сочетании с твердофазной экстракцией для выявления незаконного применения станозолола по образцам мочи человека

Обоснование: Станозолол — анаболический андрогенный стероид, включённый в раздел S1 Запрещённого списка Всемирного антидопингового агентства. При жидкостно-жидкостной экстракции с последующей газовой хроматографией и масс-спектрометрией (GC-MS) он характеризуется низким откликом и выраженным влиянием матрицы в образцах мочи. Поэтому совершенствование пробоподготовки имеет принципиальное значение для эффективного выявления станозолола и его метаболитов.

Методы: Разработан и валидирован метод определения станозолола и его метаболитов (3'-OH-станозолола, 4β-OH-станозолола и 16β-OH-станозолола) в моче человека с использованием газовой хроматографии с высокоразрешающей масс-спектрометрией Orbitrap в сочетании с оптимизированной смешанной твердофазной экстракцией. Метод применили к образцам мочи двух добровольцев, однократно принявших станозолол внутрь; образцы собирали в течение 30 дней после приёма.

Результаты: Оптимизированная смешанная твердофазная экстракция уменьшила влияние матрицы, обеспечила удовлетворительную эффективность извлечения и высокую чувствительность, что позволило уверенно идентифицировать все целевые соединения в моче человека. При валидации коэффициент извлечения составил 74–81%, пределы обнаружения — 0,1–0,25 нг/мл. Метод успешно применили для определения профилей выведения станозолола и его метаболитов с мочой в образцах добровольцев с положительным результатом.

Выводы: Представлен новый протокол выявления станозолола и его метаболитов, повышающий эффективность контроля незаконного применения станозолола и способствующий обеспечению честности спортивных соревнований. Этот протокол может служить надёжным инструментом для антидопинговых лабораторий, обеспечивая точное выявление незаконного применения станозолола и поддерживая соблюдение принципов честной спортивной борьбы.