Аддитивное действие низких концентраций 17β-эстрадиола и прогестерона на продукцию оксида азота эндотелиальными клетками сосудов человека через общие сигнальные пути

Потенциальная польза низкодозовых препаратов эстрогенов и прогестерона (P4) для сердечно-сосудистой системы при лечении климактерических симптомов у женщин в постменопаузе остаётся неясной, поскольку данных об их совокупном влиянии на сосуды недостаточно. Защитное действие низких концентраций P4 и 17β-эстрадиола (E2) по отдельности и в сочетании (P4+E2) изучали в негеномной модели сосудистой защиты, оценивая острое увеличение продукции оксида азота (NO) культивируемыми эндотелиальными клетками пупочной вены человека (HUVEC). Воздействие P4+E2 в концентрации 5 нМ в течение 20 минут значительно увеличивало продукцию NO и фосфорилирование эндотелиальной NO-синтазы (eNOS), тогда как каждый из стероидов по отдельности в концентрации 5 нМ эффекта не оказывал. Сочетание P4+E2 в концентрации 5 нМ также усиливало фосфорилирование ERK и Akt, воспроизводя эффекты более высоких концентраций P4 и E2 по отдельности. Предварительная обработка ингибиторами PI3K (вортманнин), Akt (ML-9) и митоген-активируемой протеинкиназы (AZD6244 и U0126) полностью блокировала ответ NO на сочетание P4+E2 в концентрации 5 нМ. Совместное применение специфических агонистов рецепторов эстрогена и прогестерона в концентрации 5 нМ показало, что в стимуляции продукции NO под действием P4+E2 участвуют мембранный рецептор прогестерона альфа (mPRα, также известный как PAQR7), рецептор эстрогена, сопряжённый с G-белком (GPER), и рецептор эстрогена альфа (ERα), но не ERβ. P4+E2 оказывали и геномное действие, повышая уровни мРНК mPRα, GPER, циклооксигеназы-1 и простациклин-синтазы. В совокупности результаты показывают, что низкая концентрация P4+E2 быстро повышает продукцию NO в HUVEC посредством mPRα, ERα и GPER с участием общих сигнальных путей PI3K/Akt и митоген-активируемой протеинкиназы. Эти результаты, полученные in vitro, позволяют предположить, что низкие дозы E2 и P4 могут оказывать некоторое благоприятное воздействие на сердечно-сосудистую систему и in vivo при применении в рамках заместительной гормональной терапии у женщин в постменопаузе.