Оценка нефротоксичности суммы терпенов корневища частухи восточной на клетках HK-2 in vitro и их способности индуцировать апоптоз

Целью исследования было оценить нефротоксичность суммы терпенов корневища частухи восточной для клеток проксимальных канальцев почки человека HK-2 и изучить механизм индукции апоптоза, чтобы получить данные для дальнейшего изучения спорного вопроса о нефротоксичности этих соединений. Жизнеспособность клеток оценивали колориметрическим методом с МТТ, апоптоз — методом проточной цитометрии. С помощью иммуноблоттинга определяли уровни белков каспазы-3, Bcl-2, Bcl-xL, Kim-1, кластерина и TFF-3; методом количественной ПЦР оценивали экспрессию соответствующих мРНК. По данным проточной цитометрии, после обработки суммой терпенов в концентрациях 6,25×10⁻⁵, 3,125×10⁻⁵ и 1,5625×10⁻⁵ г/мл доля апоптотических клеток составила соответственно (37,48±1,76)%, (26,91±1,91)% и (25,61±2,05)%. Иммуноблоттинг показал значимое снижение уровней белков Bcl-2 и Bcl-xL и повышение уровня каспазы-3 после обработки суммой терпенов в этих концентрациях. Результаты количественной ПЦР совпадали с данными иммуноблоттинга: экспрессия мРНК Bcl-2 и Bcl-xL значимо снижалась, а экспрессия мРНК каспазы-3 повышалась. По данным иммуноблоттинга и количественной ПЦР, после обработки суммой терпенов корневища частухи восточной в тех же концентрациях значимо повышались уровни белка и мРНК Kim-1, кластерина и TFF-3. Результаты исследования на клетках HK-2 in vitro позволяют предположить, что сумма терпенов корневища частухи восточной может оказывать нефротоксическое действие, однако это требует дальнейшего подтверждения. Кроме того, полученные данные свидетельствуют о способности этих соединений индуцировать апоптоз клеток HK-2 и могут послужить основой для изучения нефротоксичности и безопасного применения частухи восточной.