Последовательная омиксная характеристика мочи лошади

Моча лошади легко собирается и содержит молекулы, которые можно измерять методом масс-спектрометрии и использовать в качестве биомаркеров здоровья, заболеваний или применения препаратов. Целью исследования был анализ микролитровых объёмов мочи лошади для выделения, идентификации и количественной оценки белков, полярных метаболитов и неполярных липидов. Для последовательной омиксной характеристики собрали мочу здоровой 12-летней кобылы породы квотерхорс, получавшей луговое сено и витаминно-минеральные добавки при ограниченном доступе к пастбищу. Мочу обрабатывали метил-трет-бутиловым эфиром (МТБЭ) и метанолом, разделяя её на три отдельные фазы для определения белков, неполярных липидов и полярных метаболитов в рамках одной жидкость-жидкостной экстракции; процедуру повторили дважды. Каждую фазу анализировали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией высокого разрешения (LC-MS/MS), чтобы определить белковые последовательности и относительное содержание белков, а также идентифицировать и количественно оценить малые полярные метаболиты и липиды. Были выявлены 46 белков мочи, многие из которых связаны с нормальной функцией почек, структурными и циркулирующими белками, а также 474 малых полярных метаболита и только 10 липидных молекул. Метаболиты преимущественно относились к циклу мочевины, утилизации аммиака и путям обмена аминокислот, а также включали молекулы, характерные для растительного рациона. Выявленные липиды представляли собой триглицериды и фосфолипиды. Полученные данные демонстрируют возможность полной омиксной характеристики мочи лошади на основе масс-спектрометрии из одной аликвоты средней порции мочи объёмом 333 мкл. Эти омиксные данные могут служить базовым профилем состава мочи здоровой кобылы, а описанные методы — применяться для мониторинга прогрессирования заболеваний, состояния здоровья и применения препаратов.