Идентификация основного аллергена пыльцы полыни массой 62 кДа как предполагаемой галактозооксидазы

Введение: Около 20 лет назад белок массой 60–70 кДа был описан как основной аллерген пыльцы полыни обыкновенной (Artemisia vulgaris). Цель настоящего исследования — идентифицировать этот белок и охарактеризовать его молекулярные свойства.

Методы: Для выявления аллергена массой 60–70 кДа использовали сыворотки 113 китайских и 20 нидерландских пациентов с аллергией на полынь или сенсибилизацией к ней, а также объединённые образцы сывороток. Экстракты пыльцы семи видов полыни сравнивали методом иммуноблоттинга. Для идентификации предполагаемого аллергена полыни массой 60–70 кДа проводили транскриптомный и протеомный анализ пыльцы A. annua с применением масс-спектрометрии. Связывание IgE с очищенным природным и рекомбинантным аллергенами оценивали с помощью ImmunoCAP. Четырнадцати китайским пациентам с аллергией на полынь провели внутрикожные пробы с очищенным природным аллергеном.

Результаты: При иммуноблоттинге у всех семи видов полыни выявлялись две основные полосы массой 12 и 25 кДа и слабая полоса массой 70 кДа. Сочетание транскриптомного и протеомного анализа показало, что высокомолекулярный аллерген пыльцы A. annua представляет собой предполагаемую галактозооксидазу массой 62 кДа с предполагаемым сайтом N-гликозилирования. Более чем у 94% пациентов с аллергией на пыльцу полыни выявлялись IgE к этому аллергену. Связывание IgE с негликозилированной рекомбинантной формой подтвердили лишь у меньшинства пациентов (16%); при этом уровни IgE были значительно ниже. Это расхождение нельзя объяснить только реакцией на углеводный компонент природного аллергена. Внутрикожная проба с природным аллергеном была положительной у пяти из девяти сенсибилизированных пациентов.

Выводы: Ранее описанный аллерген пыльцы полыни массой 60–70 кДа, вероятнее всего, представляет собой предполагаемую галактозооксидазу массой 62 кДа, получившую обозначение Art an 7.