Противомалярийное действие стандартизированного этанольного экстракта листьев Annickia polycarpa (DC.) Setten and Maas ex I.M. Turner (Annonaceae) у мышей, инфицированных Plasmodium berghei, и нормализация основных гематологических показателей

Этнофармакологическая значимость: Малярия представляет собой глобальную проблему общественного здравоохранения из-за большого числа ежегодных случаев инфицирования и летальных исходов, обусловленных гематологическими осложнениями. Кора Annickia polycarpa используется в традиционной африканской медицине как эффективное противомалярийное средство. Однако параметры стандартизации A. polycarpa не установлены. Противомалярийные свойства её листьев также неизвестны.

Цель: Стандартизировать этанольный экстракт листьев A. polycarpa (APLE), изучить его противомалярийные свойства и влияние лечения на гематологические показатели у мышей, инфицированных Plasmodium berghei, с использованием теста Рэйна.

Материалы и методы: Малярийную инфекцию моделировали инокуляцией самок мышей линии ICR 1,0 × 10 эритроцитов, инфицированных P. berghei, в 0,2 мл крови внутрибрюшинно. Через 3 дня начинали лечение: APLE в дозах 50, 200 или 400 мг/кг перорально, хинин 30 мг/кг внутримышечно (препарат сравнения) либо стерильная вода (отрицательный контроль) 1 раз в сутки на протяжении 4 последовательных дней. В каждой группе определяли противомалярийную активность и основные показатели течения малярии, включая гиперпаразитемию, среднее изменение массы тела и среднюю продолжительность выживания (MST). С помощью общего анализа крови также оценивали изменения числа лейкоцитов, эритроцитов и тромбоцитов, концентрации гемоглобина, гематокрита и среднего объёма эритроцита у здоровых мышей до инфицирования, а также на 3-й и 8-й день после инокуляции. Стандартизацию проводили на основании химического профилирования методом UHPLC-MS и количественного фитохимического анализа.

Результаты: APLE, стандартизированный по общему содержанию алкалоидов, фенольных соединений и сапонинов, вызывал значимое (p < 0,05) дозозависимое снижение средней гиперпаразитемии, составлявшей 22,78 ± 0,93%; минимальный уровень паразитемии — 2,01 ± 0,25% — достигался на 8-й день при пероральном введении в дозе 400 мг/кг. При внутримышечном введении хинина в дозе 30 мг/кг минимальный уровень паразитемии составлял 6,15 ± 0,92%. Кроме того, APLE в дозах 50–400 мг/кг вызывал выраженную противомалярийную активность — 89,22–95,50%. Противомалярийная активность хинина в дозе 30 мг/кг составляла 86,22%. APLE также способствовал увеличению массы тела по обратной дозозависимости; эффект был значимым (p < 0,05) при дозе 50 мг/кг. Кроме того, APLE дозозависимо увеличивал среднюю продолжительность выживания мышей с малярией; при дозе 400 мг/кг выживаемость составляла 100%. Хинин в дозе 30 мг/кг также обеспечивал 100% выживаемость, но не способствовал значимому (p > 0,05) увеличению массы тела. Гематологическое исследование показало развитие у инфицированных мышей лейкопении, эритроцитоза, микроцитарной анемии и тромбоцитопении. Эти изменения регрессировали на фоне лечения APLE в дозах 50–400 мг/кг или хинином в дозе 30 мг/кг, но сохранялись у животных отрицательного контроля. При анализе химического профиля APLE методом UHPLC-MS были идентифицированы один оксоапорфиновый и два апорфиновых алкалоида (1–3). Алкалоиды 1 и 3 впервые выявлены в данном растении.

Выводы: Полученные результаты свидетельствуют о выраженном противомалярийном, иммуномодулирующем, эритропоэтическом и кроветворном действии APLE при малярийной инфекции. APLE также способен устранять неблагоприятные физиологические изменения, вызванные малярией, и тем самым способствовать клиническому выздоровлению. Эти свойства APLE обусловлены содержащимися в нём соединениями, особенно апорфиновыми и оксоапорфиновыми алкалоидами.