Транскрипционная активация ELAVL1 фактором FOXC1 способствует ферроптозу при ишемии/реперфузии миокарда через регуляцию аутофагии

Цель: Ишемия миокарда — наиболее распространённая форма сердечно-сосудистых заболеваний и ведущая причина заболеваемости и смертности. Понимание механизмов этого состояния имеет решающее значение для разработки эффективных методов лечения. Целью настоящего исследования было изучить функциональную роль ELAVL1 и механизмы, посредством которых он регулирует ишемическое/реперфузионное повреждение миокарда.

Методы: В исследовании использовали мышиную модель ишемии/реперфузии миокарда и культивируемые клетки миокарда, подвергавшиеся гипоксии/реперфузии. Признаки ферроптоза оценивали по активности ЛДГ и GPx4, содержанию железа в клетках, активных форм кислорода, продуктов перекисного окисления липидов и восстановленного глутатиона. Уровни экспрессии маркеров аутофагии — Beclin-1, p62 и LC3, а также ELAVL1 и FOXC1 — определяли с помощью количественной ОТ-ПЦР в реальном времени, иммунного окрашивания и вестерн-блоттинга. Для изучения взаимодействия ELAVL1 с мРНК Beclin-1 и FOXC1 с промотором ELAVL1 применяли анализ РНК-иммунопреципитации, биотин-зависимое выделение РНК-белковых комплексов, хроматин-иммунопреципитацию и анализ активности двойной люциферазы. Жизнеспособность клеток оценивали с помощью теста CCK-8. Для оценки ишемического/реперфузионного повреждения миокарда проводили окрашивание TTC.

Результаты: Операция моделирования ишемии/реперфузии миокарда индуцировала ферроптоз и повышала уровень ELAVL1. Подавление экспрессии ELAVL1 уменьшало ферроптоз и ослабляло ишемическое/реперфузионное повреждение. si-ELAVL1 подавляла аутофагию, а ингибирование аутофагии с помощью ингибитора уменьшало ферроптоз и повреждение клеток миокарда при ишемии/реперфузии. Усиление аутофагии устраняло влияние подавления ELAVL1 на ферроптоз и ишемическое/реперфузионное повреждение. ELAVL1 непосредственно связывался с мРНК Beclin-1 и стабилизировал её. Кроме того, при гипоксии/реперфузии FOXC1 связывался с промоторной областью ELAVL1 и активировал его транскрипцию.

Выводы: Транскрипционная активация ELAVL1 фактором FOXC1 может способствовать ферроптозу при ишемии/реперфузии миокарда посредством регуляции аутофагии, приводя к повреждению миокарда. Подавление опосредованного ELAVL1 аутофагического ферроптоза может стать новым подходом к лечению ишемического/реперфузионного повреждения миокарда.