Экспресс-скрининг природных ингибиторов липазы из алисмы восточной с помощью биоавтографии после высокоэффективной тонкослойной хроматографии в сочетании с масс-спектрометрией

Ингибиторы липазы — перспективный класс гиполипидемических соединений. Подавляя активность панкреатической липазы человека, они препятствуют всасыванию триглицеридов в организме. Традиционная китайская медицина (ТКМ) привлекает всё больше внимания как источник перспективных исходных соединений для разработки лекарственных средств и быстрого поиска и идентификации ингибиторов ферментов природного происхождения. Цель работы — выявить неизвестные ингибиторы липазы в алисме восточной методом анализа, ориентированного на биологическую активность, — тонкослойной хроматографии с биоавтографией, а затем определить их структуру с помощью масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением через интерфейс ТСХ-МС с элюированием. По молекулярным массам и ионам-фрагментам, полученным методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии с масс-спектрометрией (ВЭТСХ-МС), в экстрактах алисмы восточной выявили 11 природных ингибиторов липазы. Их дополнительно охарактеризовали с помощью ряда взаимодополняющих методов, включая анализ УФ-спектров, характерных сигналов протонов в спектрах ЯМР 1H и полярности соединений. Предварительно все 11 ингибиторов отнесли к тритерпеноидам: алисол B (m/z 495,50 [M + Na]), 23-ацетат алисола B (m/z 537,58 [M + Na]), 11-дезоксиалисол B (m/z 479,50 [M + Na]), 23-ацетат 11-дезоксиалисола B (m/z 521,50 [M + Na]), алисол A/эпиалисол A (m/z 513,50 [M + Na]), 16-оксо-11-дезоксиалисол A (m/z 511,50 [M + Na]), 16-оксоалисол A (m/z 527,50 [M + Na]), алисол C (m/z 509,58 [M + Na]), 23-ацетат алисола C (m/z 551,50 [M + Na]), 23-ацетат алисола M (m/z 567,50 [M + Na]) и алисманол Q/неоалисол (m/z 493,42 [M + Na]). Этот комплексный подход позволяет быстро выявлять ингибиторы липазы в сложных растительных экстрактах и создаёт основу для идентификации и выделения соединений, активных в отношении других ферментных систем, а также других соединений с терапевтической ценностью.