Анализ траекторий наночастиц для количественного определения внеклеточных везикул и оценки их размеров

Физиологические и патофизиологические функции внеклеточных везикул (ВВ) получают все большее признание, поэтому исследования ВВ стали быстро развивающимся научным направлением. Существует множество методов выделения ВВ, каждый из которых имеет определенные преимущества и недостатки, влияющие на выход и чистоту получаемого препарата. Поэтому для интерпретации последующих результатов и сопоставления данных, полученных в разных лабораториях, важно охарактеризовать препарат ВВ, выделенный из конкретного источника выбранным методом. Для определения размеров и количества ВВ используют различные методы; эти параметры могут изменяться при заболеваниях или под воздействием внешних условий. Анализ траекторий наночастиц (NTA) — одна из ведущих технологий высокопроизводительного анализа отдельных ВВ. В настоящей работе представлен подробный протокол количественного определения и оценки размеров ВВ, выделенных из околояичниковой жировой ткани мышей и плазмы человека, с использованием передовой технологии NTA, представляющей значительный прогресс в этой области. Показано, что этот метод обеспечивает воспроизводимые и достоверные данные об общей концентрации частиц и распределении ВВ по размерам при их выделении из различных источников разными методами; результаты подтверждены с помощью трансмиссионной электронной микроскопии. Адаптация этого прибора для NTA позволит стандартизировать методы анализа траекторий наночастиц, повысив строгость и воспроизводимость исследований ВВ.