Метаболизм перорального туринабола под действием холестерин-24-гидроксилазы CYP46A1 головного мозга человека

Микросомальный фермент цитохрома P450 человека CYP46A1 играет ключевую роль в выведении холестерина из головного мозга. Он осуществляет 24-гидроксилирование холестерина, имеющее исключительное значение для памяти и когнитивных функций. В настоящем исследовании продемонстрирована каталитическая активность CYP46A1 человека в отношении анаболического андрогенного стероида перорального туринабола (дегидрохлорметилтестостерона; 4-хлор-17β-дигидрокси-17α-метиландроста-1,4-диен-3-она), являющегося допинговым веществом. CYP46A1 стал первым микросомальным стероид-преобразующим ферментом P450 человека, для которого показана активность в отношении этого ксенобиотика. Кроме того, in vitro исследовано ингибирующее действие перорального туринабола на превращение холестерина: показана конкуренция двух субстратов за активный центр CYP46A1, что может иметь значение для потенциальных патогенетических эффектов перорального туринабола. Превращение перорального туринабола оказалось селективным: согласно данным ВЭЖХ, образовывался только один продукт. Для получения этого продукта в количестве, достаточном для анализа методом ЯМР, была успешно разработана система экспрессии полноразмерного CYP46A1 человека и редуктазы цитохрома P450 (CPR) на бицистронном векторе, обеспечивающая селективное 24-гидроксилирование холестерина в E. coli с выходом в миллиграммовых количествах. С помощью этой новой цельноклеточной системы было выполнено превращение перорального туринабола, а образовавшийся под действием CYP46A1 продукт выделен и идентифицирован методом ЯМР как 16β-гидроксипероральный туринабол.