Потенциальное лечение дерматофитии, вызванной Trichophyton rubrum, у крыс с помощью местно применяемых серебряных наночастиц, полученных методом зелёного синтеза с экстрактом Achillea santolina

Trichophyton rubrum — наиболее распространённый дерматофит, вызывающий кожные инфекции у человека и животных (дерматофитию). В настоящем исследовании оценивали противодерматофитную активность серебряных наночастиц, полученных методом зелёного синтеза с использованием экстракта Achillea santolina (AS-AgNPs), in vitro и in vivo на модели кожной дерматофитии, вызванной T. rubrum, у крыс (TRD). Зелёный синтез AS-AgNPs проводили с использованием экстракта A. santolina; полученные наночастицы характеризовали методом УФ-видимой спектроскопии, по дзета-потенциалу, а также с помощью методов визуализации и анализа, включая просвечивающую электронную микроскопию (TEM), рентгеновскую дифракцию (XRD), инфракрасную спектроскопию с преобразованием Фурье (FTIR) и энергодисперсионный рентгеновский анализ (EDX). Противогрибковую активность AS-AgNPs оценивали методом микроразведений в бульоне, по подавлению прорастания конидий и роста гиф. С помощью TEM и сканирующей электронной микроскопии изучали механизм противогрибкового действия AS-AgNPs. AS-AgNPs подавляли рост T. rubrum при минимальной ингибирующей концентрации 128 мкг/мл, а также тормозили прорастание конидий и рост гиф на 55,3 и 84,6% соответственно. Под действием AS-AgNPs изменялась структура мицелия, повышалась проницаемость клеточной мембраны и повреждалась клеточная стенка. Значительное повышение проницаемости мембраны грибка было связано со снижением биосинтеза эргостерола. При воздействии AS-AgNPs также наблюдались увеличение содержания внутриклеточных активных форм кислорода и индукция апоптоза. Кроме того, AS-AgNPs нарушали целостность клеточной стенки, о чём свидетельствовало снижение активности β-(1,3)-D-глюкансинтазы и хитинсинтазы. При минимальной ингибирующей концентрации AS-AgNPs обладали очень низкой токсичностью для первичных дермальных фибробластов человека (HDF). Местное лечение инфицированной кожи AS-AgNPs в модели TRD у крыс приводило к значительному снижению грибковой нагрузки через 7 дней и полной элиминации грибковых конидий, а через 14 дней — к выраженному восстановлению структуры эпидермиса и дермы по сравнению с контрольными животными. Примечательно, что AS-AgNPs значительно уменьшали инфильтрацию воспалительными клетками, одновременно снижая содержание провоспалительных цитокинов в тканях, включая TNF-α, IL-1, IL-6, MOP и IL-17. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что AS-AgNPs могут представлять собой новый вариант местной терапии дерматофитии, вызванной T. rubrum.