РНК-транскрипты в клетках яичника человека: двукратная криоконсервация не влияет на потенциал развития

Иногда по медицинским показаниям уже размороженная ткань не может быть повторно трансплантирована, и ткань яичника приходится замораживать снова для последующей пересадки. Исследований повторной криоконсервации клеток яичника немного. Ранее было показано, что между тканью, замороженной и размороженной один раз, и тканью, повторно замороженной и размороженной, не различаются плотность фолликулов, доля пролиферирующих ранних преантральных фолликулов, частота атрезии и ультраструктурное качество. Однако молекулярные механизмы влияния повторной криоконсервации на потенциал развития клеток яичника неизвестны. Целью экспериментов было изучить влияние повторной заморозки и разморозки ткани яичника на экспрессию генов, их функциональную аннотацию и белок-белковые взаимодействия. Также оценивали морфологию и биологическую активность примордиальных, первичных и вторичных фолликулов для последующего использования этих фолликулов при создании искусственных яичников. Для определения различий в профиле транскриптома в клетках четырех групп применяли технологию секвенирования мРНК второго поколения с высокой пропускной способностью и точностью: клетки, криоконсервированные один раз (замороженные и размороженные) (группа 1), клетки, криоконсервированные дважды (повторно замороженные и размороженные после первой криоконсервации) (группа 2), клетки, криоконсервированные один раз и культивированные in vitro (группа 3), и клетки, криоконсервированные дважды и культивированные in vitro (группа 4). Были выявлены незначительные изменения морфологии и биологической активности примордиальных, первичных и вторичных фолликулов; в итоге была оценена пригодность этих фолликулов для формирования искусственных яичников. Установлено, что во время криоконсервации путь CEBPB/CYP19A1 может участвовать в регуляции эстрогенной активности, а CD44 имеет ключевое значение для развития клеток яичника. Анализ экспрессии генов в криоконсервированных клетках яичника показывает, что двукратная повторная криоконсервация не оказывает существенного влияния на их потенциал развития. Если ткань яичника разморожена, но не может быть трансплантирована, ее можно сразу повторно заморозить.