Функциональное исследование консервативных последовательностей на дистальной поверхности ангиотензиногена: краткое сообщение

Введение: Ангиотензиноген (AGT) — важнейший компонент ренин-ангиотензиновой системы. У разных видов в областях петли и β-слоя AGT имеются высококонсервативные последовательности, однако их функции не изучены.

Методы: Самцам мышей с дефицитом AGT, специфичным для гепатоцитов (hepAGT), на фоне дефицита рецептора липопротеинов низкой плотности вводили аденоассоциированный вирусный вектор (AAV) серотипа 2/8, кодирующий мышиный AGT с мутациями консервативных последовательностей в области петли (AAV.loop-Mut), β-слоя (AAV.βsheet-Mut) или обеих областях (AAV.loop/βsheet-Mut). В качестве контроля использовали AAV, содержащий мышиный AGT дикого типа (AAV.mAGT), или нулевой вектор (AAV.null). Через 2 недели после введения AAV всех мышей в течение 12 недель кормили западной диетой. Для определения механизмов регуляции секреции AGT в гепатоцитах указанные мутантные варианты AAV трансдуцировали в клетки HepG2.

Результаты: У мышей hepAGT, инфицированных AAV.loop-Mut или AAV.βsheet-Mut, концентрация AGT в плазме, систолическое артериальное давление и выраженность атеросклероза были сопоставимы с таковыми у мышей, инфицированных AAV.mAGT. Интересно, что у мышей hepAGT, инфицированных AAV.loop/βsheet-Mut, концентрация AGT в плазме, систолическое артериальное давление и размер атеросклеротических поражений не отличались от показателей мышей, инфицированных AAV.null. При этом количество мРНК Agt в печени увеличивалось в сопоставимой степени с таковым у мышей, инфицированных AAV.mAGT. Иммуногистохимическое окрашивание показало накопление белка AGT в гепатоцитах мышей, инфицированных AAV.loop/βsheet-Mut, а также в клетках HepG2, трансдуцированных AAV.loop/βsheet-Mut. Накопившийся AGT не локализовался в эндоплазматическом ретикулуме.

Выводы: Консервативные последовательности в области петли или β-слоя по отдельности не влияют на регуляцию AGT, однако консервативные последовательности в обеих областях синергично участвуют в секреции AGT гепатоцитами.