Длинная некодирующая РНК PVT1 подавляет апоптоз через ось miR-30d-5p/CaMKIIδ при гипоксически-ишемическом повреждении головного мозга

Ранее мы показали важную роль miR-30d-5p в апоптозе нейронов развивающегося мозга при гипоксии-ишемии, однако конкретные механизмы этого процесса оставались неясными. В настоящем исследовании изучены механизмы действия miR-30d-5p у новорождённых мышей с гипоксически-ишемическим повреждением головного мозга, а также в первичных нейронах, подвергнутых лишению кислорода и глюкозы. РНК-секвенирование показало, что длинная некодирующая РНК PVT1 была наиболее значимо изменённой по экспрессии среди длинных некодирующих РНК, имеющих предполагаемые сайты связывания miR-30d-5p. Флуоресцентная гибридизация in situ в сочетании с иммунофлуоресцентным окрашиванием показала, что длинная некодирующая РНК PVT1 присутствует в цитоплазме нейронов в больших количествах и её уровень повышается после гипоксически-ишемического повреждения головного мозга или лишения кислорода и глюкозы. Подавление PVT1 усиливало апоптоз нейронов, вызванный лишением кислорода и глюкозы, и усугубляло повреждение мозга, что подтверждалось увеличением объёма инфаркта и нарушением пространственной памяти. Напротив, гиперэкспрессия PVT1 уменьшала повреждение мозга, о чём свидетельствовали менее выраженные патологические изменения и уменьшение неврологического дефицита. Кроме того, было установлено, что PVT1 регулирует апоптоз нейронов посредством повышения экспрессии CaMKIIδ за счёт связывания miR-30d-5p. Нокдаун PVT1 снижал экспрессию CaMKIIδ и уменьшал ингибирующее фосфорилирование GSK3β; применение ингибитора miR-30d-5p приводило к выраженному обратному эффекту. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что PVT1 выполняет нейропротекторную функцию при гипоксически-ишемическом повреждении мозга, регулируя апоптоз нейронов через ось PVT1/miR-30d-5p/CaMKIIδ.