Ближняя инфракрасная фотоиммунотерапия для эффективного уничтожения клеток рака яичников путем индукции иммуногенной клеточной гибели

Рак яичников представляет собой одну из наиболее распространенных форм гинекологического рака у женщин. Существующие методы лечения — хирургическое вмешательство и химиотерапия — не позволяют контролировать локальные и отдаленные микрометастазы. Ближняя инфракрасная фотоиммунотерапия (БИК-ФИТ) — недавно разработанная лечебная стратегия, которая может избирательно уничтожать опухолевые клетки, индуцировать иммуногенную клеточную гибель и тем самым стимулировать противоопухолевый иммунный ответ. В этом исследовании мы разработали пять препаратов для БИК-ФИТ, конъюгировав слитые белки scFv-SNAP-tag с BG-модифицированным IRdye700 для нацеливания на клетки рака яичников, экспрессирующие поверхностные антигены эпидермальный фактор роста (EGFR), Her2, FOLR1, TROP2 и TF. Проточная цитометрия и микроскопические исследования подтвердили специфичность связывания всех изученных препаратов БИК-ФИТ с соответствующими гиперэкспрессирующими опухолевыми клетками. Кроме того, все исследованные препараты БИК-ФИТ продемонстрировали специфическое связывание с тканями рака яичников человека, что было подтверждено мультиплексной иммунофлуоресцентной визуализацией. Мы показали, что все пять препаратов БИК-ФИТ снижали жизнеспособность клеток дозозависимым образом, при значениях IC50 примерно 42–283 нМ. Более того, все исследованные препараты БИК-ФИТ вызывали гибель клеток с эффективностью примерно 80–92%. Препараты БИК-ФИТ индуцировали основные признаки иммуногенной клеточной гибели, такие как экспрессия кальретикулина, HSP70 и HSP90 на поверхности клеток, а также внеклеточное высвобождение АТФ и HMGB1. Кроме того, совместное культивирование незрелых дендритных клеток с погибающими опухолевыми клетками, нацеленными препаратами БИК-ФИТ к EGFR и TF, приводило к усилению созревания дендритных клеток, о чем свидетельствовало повышение экспрессии CD80, CD86, CD40 и HLA-DR. В целом наши результаты свидетельствуют о том, что все пять исследованных препаратов БИК-ФИТ обладают большим потенциалом для применения в лечении рака яичников.50