Телопептиды коллагена II типа вызывают повреждение ткани в культурах хряща человека, полученных при тотальном эндопротезировании

Цель: выяснить, могут ли телопептиды коллагена II типа вызывать остеоартритическое повреждение ткани через рецептор к нативному белку на основе исследования суставного хряща человека. Методы: фрагменты хряща получали у пациентов, которым выполняли тотальное эндопротезирование. Культуры хрящевой ткани или первичные культуры хондроцитов обрабатывали N- или C-телопептидом (NT или CT) в концентрации 30 мкM в течение 7 дней или 24 ч. Потерю протеогликанов из хряща оценивали с помощью анализа с 1,9-диметилметиленовым синим (DMMB). Содержание матриксных металлопротеиназ (MMP), MMP-3 и MMP-13, а также интегрина бета-1 (ITGB1) в кондиционированной среде или клеточных лизатах определяли методом вестерн-блоттинга или полимеразной цепной реакции в реальном времени (ПЦР). Результаты: и NT, и CT вызывали значимую потерю протеогликанов из хряща по сравнению с фосфатно-солевым буфером (PBS), использованным как носитель (18,45 ± 6,58 или 15,50 ± 4,91 мкг PG/мг влажного хряща при обработке NT или CT против 25,61 ± 4,14 мкг PG/мг влажного хряща при обработке PBS; p = 0,037 для NT, p = 0,004 для CT). Повышение экспрессии MMP-3 и MMP-13 под действием NT или CT отмечали через 24 ч в культурах хондроцитов и на 4-е и 7-е сутки после обработки в культурах хряща. CT вызывал более выраженную экспрессию ITGB1 в хондроцитах, чем NT. Выводы: телопептиды коллагена II типа могут повреждать суставной хрящ человека и повышать экспрессию MMP-3 и MMP-13. Катаболический эффект CT, вероятно, опосредован ITGB1.