Комплексное метаболическое профилирование флуоксиместерона in vivo методом газовой хроматографии с высокоразрешающей масс-спектрометрией на Orbitrap: интегрированная стратегия выявления новых биомаркеров для антидопингового контроля

Флуоксиместерон (9α-фтор-11β,17β-дигидрокси-17α-метиландрост-4-ен-3-он) относится к запрещённым анаболическим андрогенным стероидам (ААС) согласно правилам Всемирного антидопингового агентства (WADA). Детальное изучение путей его метаболизма и выявление новых метаболитов необходимы для совершенствования допинг-контроля. В исследовании два здоровых добровольца мужского пола однократно приняли внутрь 10 мг флуоксиместерона; образцы мочи систематически собирали в течение 30 дней. Оптимизированная трёхэтапная пробоподготовка в сочетании с газовой хроматографией и высокоразрешающей масс-спектрометрией на Orbitrap (GC-Orbitrap-HRMS) позволила комплексно выявить свободные метаболиты, а также метаболиты, конъюгированные с глюкуроновой кислотой и сульфатом. Всего идентифицировали исходное соединение и десять метаболитов, включая пять новых структур, впервые описанных в настоящем исследовании. Основными метаболическими превращениями были восстановление 4-еновой связи, восстановление 3-кетогруппы, 6β-гидроксилирование, окисление 11β-гидроксильной группы и перестройка стероидного скелета. Профили выведения продемонстрировали значительную межиндивидуальную вариабельность концентраций метаболитов и кинетики элиминации. Примечательно, что впервые выявленный метаболит F-M7 (9α-фтор-17α-метил-3ξ,11β,17β-триол-5ξ-андростан) обнаруживался в форме глюкуронидного конъюгата в течение 5 суток после приёма препарата, что указывает на его потенциальную ценность в качестве надёжного биомаркера. Полученные данные расширяют представления о метаболизме флуоксиместерона in vivo и предлагают перспективные аналитические мишени для повышения чувствительности и надёжности антидопингового контроля.