Эффективность направленного на CD123 иммуноконъюгата БЦЖ Hsp70 с антителом при остром миелоидном лейкозе у детей

Введение: Лечение рецидивирующего или рефрактерного острого миелоидного лейкоза (ОМЛ) у детей остаётся сложной задачей из-за наличия лейкозных стволовых клеток (ЛСК) и низкой иммуногенности опухоли. Цель исследования — создать новый иммуноконъюгат, объединив белок теплового шока 70 (HSP70) БЦЖ с моноклональным антителом к CD123, и оценить его направленное противолейкозное действие и механизмы.

Методы: Конъюгат HSP70 с антителом синтезировали с использованием сшивающего реагента SPDP и охарактеризовали методом масс-спектрометрии с электрораспылительной ионизацией (ESI-MS) и УФ-спектрофотометрии. Способность связывать антиген оценивали методом проточной цитометрии. В опытах in vitro оценивали пролиферацию аутологичных Т-клеток (окрашивание CFSE), секрецию IFN-γ (ИФА) и цитотоксическую активность (высвобождение ЛДГ). Противолейкозный эффект in vivo оценивали на модели ксенотрансплантата MOLM13 у иммунодефицитных мышей.

Результаты: Чистота конъюгата HSP70 с антителом составила 96,2 ± 1,5%; соотношение компонентов при конъюгации было близким к 1:1 по молям, при этом способность связывать антиген сохранялась. In vitro конъюгат значительно усиливал пролиферацию аутологичных Т-лимфоцитов и секрецию IFN-γ, а также существенно повышал цитотоксичность, опосредованную цитотоксическими Т-лимфоцитами, в отношении CD123-положительных клеток ОМЛ; эффект зависел от соотношения эффекторных клеток и клеток-мишеней. In vivo конъюгат значимо уменьшал объём опухоли, выраженно стимулировал образование Th1-клеток, специфичных к MOLM13, и вызывал коагуляционный некроз с обильной инфильтрацией опухолевой ткани CD8-положительными Т-лимфоцитами.

Выводы: Иммуноконъюгат HSP70 БЦЖ с антителом к CD123 оказывает выраженное направленное противолейкозное действие за счёт усиления иммуногенности и Т-клеточного иммунитета. Он может стать перспективным средством лечения детского ОМЛ, особенно рецидивирующего или рефрактерного.

Значимость: Создан конъюгат HSP70 с моноклональным антителом к CD123, сохраняющий способность связывать антиген и иммунологическую активность; в опытах in vitro и in vivo он оказывал выраженное направленное противолейкозное действие за счёт усиления иммуногенности и Т-клеточного иммунитета. Конъюгат направлен на ЛСК и минимальную остаточную болезнь (МОБ) и превосходит отдельные препараты, восполняя пробел в разработке методов усиления иммунного ответа против CD123-положительных ЛСК при детском ОМЛ. Он предлагает новый подход к иммунотерапии и создаёт доклиническую основу для разработки препаратов против ОМЛ, способных устранять ЛСК и МОБ. Предложенный метод конъюгации HSP70 с антителом может послужить основой для разработки подходов к лечению других гематологических и солидных опухолей. Высококачественный конъюгат продемонстрировал выраженное противоопухолевое действие; токсических эффектов не отмечено, что может ускорить его внедрение в детскую онкологию.