Раскрытие биоактивного потенциала Alchemilla subcrenata Buser с помощью оптимизированной экологичной экстракции

Alchemilla subcrenata Buser — горный вид семейства Rosaceae, широко используемый в традиционной медицине, однако ранее его фитохимический состав изучали лишь ограниченно: были опубликованы только предварительные данные о содержании фенольных соединений и активности пероксидазы. В настоящем исследовании впервые проведена систематическая оптимизация условий микроволновой экстракции (MAE) этого вида с использованием плана Бокса—Бенкена в рамках методологии поверхности отклика (RSM). Одновременно оптимизировали три параметра экстракции: концентрацию этанола (30–70%, об./об.), соотношение твёрдое вещество : жидкость (1:10–1:20, масс./об.) и продолжительность экстракции (10–30 мин), оценивая 12 показателей отклика, включая общее содержание фенольных соединений и флавоноидов, результаты шести тестов на антиоксидантную активность и ингибирующую активность в отношении четырёх ферментов (ацетилхолинэстеразы, бутирилхолинэстеразы, тирозиназы и α-амилазы). Полиномиальные модели второго порядка продемонстрировали хорошую прогностическую способность для большинства показателей (R = 0,878–0,971 для 11 из 12 показателей); исключением была хелатирующая активность в отношении металлов, для которой соответствие модели оказалось ниже (R = 0,671), поэтому этот показатель исключили из оптимизации. Многоцелевое оптимальное решение включало 60% этанол, соотношение твёрдое вещество : жидкость 1:12,5 и продолжительность экстракции 10 мин. В оптимальных условиях MAE обеспечила выраженную антиоксидантную и ферментингибирующую активность экстракта Alchemilla subcrenata in vitro. При исследовании методом LC-MS/MS, впервые позволившем провести всестороннюю характеристику фенольного состава этого вида, идентифицировано 28 фенольных соединений в общей концентрации 1599,7 мкг/г экстракта. В составе преобладали кверцетин-3-O-гексозид, галловая кислота, катехин и гликозиды кемпферола; нарингенин и эскулетин впервые выявлены у этого вида. Высокое содержание гексозидов кверцетина и гидроксикоричных кислот может объяснять выявленную широкую активность в отношении нескольких мишеней и делает Alchemilla subcrenata перспективным источником биоактивных фенольных соединений, требующим дальнейшего изучения для возможного применения в нутрицевтике, фармацевтике и космецевтике.