Протеолитические ферменты и амилаза индуцируют продукцию цитокинов мононуклеарными клетками периферической крови человека in vitro

Обработка мононуклеарных клеток периферической крови человека (PBMNC) in vitro протеолитическими ферментами (бромелаином, папаином) и амилазой приводит к продукции больших количеств фактора некроза опухоли α (TNF-α), интерлейкина-1β (IL-1β) и интерлейкина-6 (IL-6), зависящей от времени инкубации и дозы. Повышение продукции TNF-α и IL-6 выявляли уже через 4–6 ч инкубации, а плато достигалось через 12–16 ч. Максимальные уровни составляли до 1500 пг TNF-α/мл на 10⁶ PBMNC, 13 000 пг IL-1β/мл на 10⁶ PBMNC и 23 000 пг IL-6/мл на 10⁶ PBMNC. В контрольных культурах содержание TNF-α, IL-1β или IL-6 не превышало 35 пг/мл на 10⁶ PBMNC. В отличие от TNF-α, который через 24 ч становился неопределяемым, пиковые уровни IL-1β и IL-6 сохранялись через 24 ч. После выдерживания раствора ферментов при 56 °C в течение нескольких часов его способность индуцировать продукцию цитокинов исчезала. Результаты нейтрализационных экспериментов с инактивирующими антителами, радиоиммунного анализа и вестерн-блоттинга после электрофоретического разделения показали, что активность, подобная TNF, выявленная в тесте на литическую активность, обусловлена TNF-α. Интерферон-α (IFN-α) и интерферон-γ (IFN-γ), не оказывавшие эффекта по отдельности, при совместном применении с ферментами синергически усиливали продукцию TNF-α. Коммерческая смесь этих ферментов (Wobenzym), также исследованная в работе, продемонстрировала аналогичную зависимость эффекта от концентрации и времени, а также синергизм с интерферонами. Синергическое усиление продукции TNF-α выявлено также при сочетании ферментов с форболовым эфиром (PMA).