Сравнение специфичности связывания лигандов эстрогеновыми рецепторами α и β и распределения транскриптов в тканях

Эстрогеновый рецептор (ER) крысы существует в виде двух подтипов — ERα и ERβ, которые различаются С-концевым лиганд-связывающим доменом и N-концевым доменом трансактивации. В этом исследовании методом ОТ-ПЦР изучали экспрессию мРНК обоих подтипов ER в тканях крысы и сравнивали специфичность связывания лигандов этими подтипами. Анализ насыщаемого связывания лигандов с белками человеческого ERα и крысиного ERβ, синтезированными in vitro, выявил один тип центров связывания 16α-йод-17β-эстрадиола с высокой аффинностью: константа диссоциации (Kd) составила 0,1 нМ для белка ERα и 0,4 нМ для белка ERβ. Большинство эстрогенных веществ и антагонистов эстрогеновых рецепторов конкурировали с 16α-[125I]йод-17β-эстрадиолом за связывание с обоими подтипами рецепторов с очень сходными предпочтительностью и степенью связывания. Для белка ERα порядок убывания был следующим: диэтилстильбэстрол > гексэстрол > диенэстрол > 4-гидрокситамоксифен > 17β-эстрадиол > кумэстрол, ICI-164384 > эстрон, 17α-эстрадиол > нафоксидин, мокэстрол > кломифен > эстриол, 4-гидроксиэстрадиол > тамоксифен, 2-гидроксиэстрадиол, 5-андростен-3β,17β-диол, генистеин. Для белка ERβ порядок был следующим: диенестрол > 4-гидрокситамоксифен > диэтилстильбэстрол > гексэстрол > кумэстрол, ICI-164384 > 17β-эстрадиол > эстрон, генистеин > эстриол > нафоксидин, 5-андростен-3β,17β-диол > 17α-эстрадиол, кломифен, 2-гидроксиэстрадиол > 4-гидроксиэстрадиол, тамоксифен, мокэстрол. Распределение ER в тканях крысы и/или относительный уровень экспрессии ERα и ERβ существенно различались. Для ERα умеренная или высокая экспрессия выявлена в матке, яичках, гипофизе, яичниках, почках, придатках яичек и надпочечниках, а для ERβ — в предстательной железе, яичниках, лёгких, мочевом пузыре, головном мозге, матке и яичках. Описанные различия между подтипами ER по относительной аффинности к лигандам и распределению в тканях могут способствовать селективному действию агонистов и антагонистов ER в различных тканях.