Модель сухого кератоконъюнктивита у мышей

Цель: Оценить влияние фармакологического подавления слезопродукции и высушивающего воздействия окружающей среды на продукцию и клиренс слезы, проницаемость эпителия роговицы, а также морфологию, пролиферацию эпителия конъюнктивы и дифференцировку бокаловидных клеток.

Методы: Слезопродукцию подавляли с помощью трансдермальных пластырей со скополамином, которые накладывали на депилированную среднюю часть хвоста самок мышей линий MC и CBA. Высушивающее воздействие создавали, помещая мышей в камеру с непрерывным потоком воздуха. Слезопродукцию и объём слезы, её клиренс и барьерную функцию роговицы сравнивали в четырёх группах: мыши без лечения, мыши в камере с воздушным потоком, мыши с пластырем со скополамином и мыши с пластырем со скополамином, помещённые в камеру с воздушным потоком. Для оценки продукции и объёма слезы использовали хлопковые нити. Клиренс слезы оценивали флуориметрически, измеряя содержание флуоресцеина в собранной слезе через 15 минут после закапывания 1% раствора флуоресцеина натрия. Барьерную функцию эпителия роговицы оценивали флуориметрически по поглощению карбоксифлуоресцеина. Морфологию конъюнктивы и плотность бокаловидных клеток оценивали на окрашенных гистологических срезах. Пролиферацию эпителия конъюнктивы определяли методом мечения бромдезоксиуридином (BrdU).

Результаты: Смачивание хлопковых нитей и клиренс слезы значительно снижались у мышей с пластырем со скополамином (P < 0,001) и у мышей с пластырем, подвергавшихся воздействию воздушного потока (P < 0,001); во второй группе снижение клиренса было более выраженным. Поглощение карбоксифлуоресцеина роговицей было значимо выше, чем у мышей без лечения, в группе со скополамином (P = 0,05), а в группе со скополамином и воздушным потоком — выше, чем во всех остальных группах (P < 0,0001). В группе со скополамином и воздушным потоком по сравнению с контрольной группой без лечения отмечались изменения морфологии эпителия конъюнктивы и значительное снижение плотности бокаловидных клеток (P < 0,001). Число пролиферирующих эпителиальных клеток конъюнктивы в этой группе было значимо выше.

Выводы: Фармакологическое подавление слезопродукции у мышей сопровождается изменениями эпителия поверхности глаза, сходными с наблюдаемыми при сухом кератоконъюнктивите у человека; высушивающее воздействие окружающей среды усугубляет эти изменения. Слезопродукция, стимулируемая холинергическими механизмами, по-видимому, необходима для поддержания здоровья поверхности глаза.