Валпроил-дефосфо-КоА: новый метаболит вальпроата, образующийся in vitro в митохондриях печени крыс

Для изучения пути β-окисления вальпроевой кислоты (VPA) исследовали её метаболизм в митохондриях in vitro, поскольку характеристика промежуточных соединений VPA в форме тиоэфиров ацил-КоА, а не только в форме свободных кислот, до настоящего времени оставалась неполной. Интактные митохондрии печени крыс инкубировали с [4,5-3H2]VPA и [2-3H]VPA. Соответствующие промежуточные соединения — валпроил-КоА, Δ2(E)-валпроил-КоА, 3-гидроксивалпроил-КоА и 3-оксвалпроил-КоА — анализировали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с обращённой фазой (ВЭЖХ) с радиометрическим и ультрафиолетовым детектированием. Был обнаружен неизвестный метаболит, образующийся из обоих меченых субстратов. При анализе соответствующей фракции пика ВЭЖХ методом масс-спектрометрии с бомбардировкой быстрыми атомами (FAB-MS) его идентифицировали как валпроил-дефосфо-КоА (валпроил-дефосфоКоА). Спектр FAB-MS подлинного образца валпроил-дефосфоКоА, синтезированного химическим путём, соответствовал спектру неизвестного соединения. Валпроил-дефосфоКоА образуется в митохондриях из валпроил-КоА, вероятно, в результате реакции, катализируемой фосфатазой. Было показано, что это превращение в большей степени зависит от энергетического состояния, отражаемого концентрациями [AXP] ([AXP] = [ATP] + [ADP] + [AMP]) и фосфата, чем от строгого соотношения [ATP]/[ADP] в митохондриях. Результаты свидетельствуют, что высокие концентрации AXP и фосфата ингибируют дефосфорилирование валпроил-КоА. Для выяснения патогенеза гепатотоксичности, ассоциированной с VPA, важно полностью определить токсикологическое значение образования валпроил-дефосфоКоА in vivo как потенциального ингибитора β-окисления жирных кислот.