Эспины в сенсорных клетках вкусовых почек грызунов

Эспины — многофункциональные белки, объединяющие актиновые филаменты в пучки. Они в высокой концентрации присутствуют в микроворсинках некоторых хемосенсорных и механосенсорных клеток, где, предположительно, регулируют целостность и/или размеры цитоскелетного каркаса из параллельных актиновых пучков. Мы установили, что у крыс и мышей аффинно очищенные антитела к эспину интенсивно окрашивают вкусовые почки языка и нёба, а также вкусовые почки глоточно-гортанной области. Наиболее интенсивное окрашивание наблюдалось в апикальной микроворсинчатой области вкусовых почек; цитоплазматическое окрашивание клеток было значительно слабее. Вкусовые почки представляют собой плотно расположенные скопления сенсорных клеток (светлых клеток II и III типов) и поддерживающих клеток (тёмных клеток I типа), которые различают по микроскопическим признакам и маркерам, специфичным для определённых типов клеток. На основании результатов, полученных с помощью демаскировки антигенов и двойной иммунофлуоресценции на эспин и маркеры сенсорных вкусовых клеток, мы предполагаем, что эспины экспрессируются преимущественно в сенсорных клетках вкусовых почек. На конфокальных изображениях вкусовых почек желобоватых сосочков крыс мы насчитали в среднем 21,5 ± 0,3 эспин-положительной клетки на вкусовую почку. Это согласуется с ранее опубликованными данными: при подсчёте на ультраструктурном уровне обнаружено 20,7 ± 1,3 светлой клетки на вкусовую почку. Антитела к эспину окрашивали веретенообразные клетки с округлыми ядрами; отмечалась 100%-ная колокализация с маркерами, выявляющими все вкусовые клетки II типа и часть клеток III типа: рецептором инозитол-1,4,5-трифосфата 3-го типа (IP3R3), α-густдуцином и белковым продуктом гена 9.5 (PGP9.5). В среднем антитела к IP3R3, α-густдуцину и PGP9.5 окрашивали соответственно 72%, 50% и 32% эспин-положительных вкусовых клеток. При исследовании срезов вкусовых почек желобоватых сосочков крыс часто обнаруживался многоярусный эспин-положительный апикальный цитоскелетный аппарат. Одна эспин-положительная зона состояла из микроворсинок длиной около 3 мкм, расположенных во вкусовой поре; от второй эспин-положительной зоны, находившейся ниже, в глубине вкусовой ямки, её отделяла зона без эспина. Во второй зоне выявлялись эспин-положительные палочковидные структуры, которые иногда простирались в базальном направлении на глубину 10–12 мкм в цитоплазму вкусовых клеток. Мы предполагаем, что эспин-положительная зона во вкусовой ямке соответствует актиновым пучкам, связанным с микроворсинками вкусовых клеток II типа, а эспин-положительные микроворсинки во вкусовой поре — одиночным микроворсинкам клеток III типа.