Анализ экспрессии генов и тропизма, опосредованных серотипами AAV1–9, у мышей после системного введения

В исследовании изучали экспрессию трансгена и биораспределение псевдотипированных аденоассоциированных вирусов (AAV) серотипов 1–9 после введения в хвостовую вену самцам мышей. С использованием трансгена люциферазы под контролем цитомегаловирусного промотора динамику экспрессии у каждого животного отслеживали на протяжении всего эксперимента. Визуализацию проводили через 7, 14, 29, 56 и 100 дней после введения в хвостовую вену. Регистрировали общее число фотонов, испускаемых каждым животным, что позволяло оценить уровень и кинетику экспрессии каждого псевдотипированного вируса. Биолюминесцентная визуализация выявила три группы по уровню экспрессии: (i) низкий уровень — AAV2, 3, 4 и 5; (ii) умеренный уровень — AAV1, 6 и 8; (iii) высокий уровень — AAV7 и 9. Кроме того, были выявлены два типа кинетики экспрессии: (i) быстрое начало — для AAV1, 6, 7, 8 и 9; (ii) медленное начало — для AAV2, 3, 4 и 5. Затем в выделенных тканях оценивали экспрессию белка и число копий вирусного генома. AAV9 характеризовался наиболее широким распределением вирусного генома и самым высоким уровнем экспрессии белка. В печени показатели экспрессии белка и числа копий генома AAV7 были сопоставимы с таковыми для AAV9. Наиболее неожиданно, что в лёгких и почках наибольшее число копий генома выявлено для AAV4; высокое число копий также обнаружено в сердце. Экспрессия AAV6 наблюдалась в сердце, печени и скелетных мышцах, что подтверждалось распределением вирусного генома.